一般毒性作用及其试验与评价方法.pptVIP

注射：经口染毒：灌胃法、喂饲法、胶囊法。特殊途径：在进行亚慢性毒性试验时，最好结合进行毒代动力学血药浓度的监测。经呼吸道染毒：染毒途径三、亚慢性毒性试验设计剂量选择和分组一般至少应设3个剂量组和1个阴性（溶剂）对照组。阴性对照组低剂量组中剂量组高剂量组组距：3~10倍，最低不小于2倍三、亚慢性毒性试验设计高剂量组应能引起明显的毒性或少量动物的死亡（少于10%）。1低剂量组应无中毒反应，相当于未观察到有害作用剂量（NOAEL）。2高低剂量组间设置1个中剂量组，比较理想的中剂量组约相当于观察到有害作用的最低剂量（LOAEL）。3原则是，尽量控制在受试动物在整个试验期既不发生死亡，又有明显毒性反应。各组剂量设计的依据：高剂量组：以急性毒性的阈剂量作为亚慢性毒性试验的最高剂量。或以该受试物LD50的1/20～1/5作为最高剂量一般在LD50的1/10～1/50之间按等比级数设计其它各组。三、亚慢性毒性试验设计三、亚慢性毒性试验设计观察指标（1）一般性指标包括每日采食量、体重变化（定期称量）、外观特征（被毛光泽、精神状态、呼吸动作、分泌物、排泄物、饮食、活动、行为等）、异常表现和中毒症状等。（2）实验室检查：血液学检查血液生化检查通常为血清天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）、尿素氮（BUN）、总蛋白（TP）、清蛋白（ALB）、血糖（GLU）、总胆红素（T-BIL）、肌酐（Crea）、总胆固醇（T-CHO）等。尿液检查包括外观、pH值、蛋白、糖、潜血和沉淀物镜检等，可提供与毒物有关的靶器官毒性和中间代谢产物的信息。STEP3STEP2STEP1脏器重量和脏器系数：一般称取心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、卵巢或睾丸、脑等脏器湿重，并计算其脏器系数。病理学检查：目的是确定化学毒物对机体毒作用的靶部位、损害的性质和程度。病理学检查包括：大体检查、常规组织病理学检查、酶组织化学检查、免疫组织化学检查、细胞超微结构检查等，（3）系统尸解和组织病理学检查活性氧增加、细胞凋亡、免疫功能异常选择相关指标进行测定，有利于探讨有害作用的机理和对安全性的评价。分子生物学和分子免疫学手段可应用于测定许多具有毒理学意义的指标。（4）分子生物学和免疫学指标对于进一步的毒理学试验观察指标的选择和毒理机制的研究具有一定的指导意义。02生物体产生的某种效应只有与其接触的化学物剂量之间呈现相关关系，才能确定此种效应是该接触物引起的。否则，可能另有原因。01（5）分析剂量-效应关系对神经系统有影响，可进行神经行为、神经反射等检查；对电解质、微量元素代谢有毒作用，则检测血钙、血磷等含量；还可增加眼科、骨髓象检查等。010203心电图、血压、眼底检测；（6）其他指标的检查030201如某物质的亚慢性毒性无作用剂量小于或等于人的可能摄入量的100倍，则表示毒性很强，应放弃该化学物的使用：在100～300倍之间者，可进行慢性毒性试验；若大于或等于300倍者则不必进行慢性试验，可直接进行毒性评价。亚慢性毒性作用评价：四、亚慢性毒性作用评价010203第三节蓄积毒性作用蓄积毒性作用的基本概念蓄积作用的研究方法一、基本概念多次间隔给予小剂量受试物，当给予受试物的时间间隔和剂量超过机体的解毒和排泄能力时，导致受试物在体内蓄积，由此引起的毒性作用称为蓄积性毒性作用。了解受试物是否具有蓄积作用及蓄积性大小如何;评定该化合物是否可引起潜在的慢性毒性危害;为制订该物质在食品中的卫生限量标准时,安全系数的选择提供依据。确定该受试物是否可以用于食品供人类长期食用。03040201目的：经皮肤染毒（五）染毒方法经皮肤染毒的方式：先使用化学法脱毛（常用脱毛剂为硫化钡加滑石粉1：4或硫化钠加淀粉1：4）或机械法脱毛（剪剃去毛），将动物脊柱两侧背毛脱去，去毛面积常为体表面积的10％。局部涂敷受试物并以玻璃纸覆盖固定一定时间接触染毒。经注射途径染毒（五）染毒方法对注射药品或需作比较毒性观察的药品进行急性毒性试验时，须作经注射途径染毒。注射途径可分为静脉注射或滴注、腹腔注射(ip)、肌内注射(im)、皮下注射(sc)、皮内注射(id)、椎管内注射等。了解化学毒物的结构式、分子量、常温常压下的状态、熔点、沸点、密度、闪点、挥发度、蒸气压、水溶性和脂溶性等理化特性，生产批号及纯度，杂质成分与含量等。确定使用哪一种计算方法求LD50，然后再设计剂量分组。LD50的计算方法常用改良寇氏法、概率单位法、霍恩氏法等。找出与受试化学毒物