乙酰一肟检测尿素.pptVIP

国标法改进前后对照表加热时间优点缺点改进前50分钟灵敏度、重现性、回收率高费时、遇光易褪色、线性范围窄改进后20分钟精密度、准确度好省时、显色较稳定、线性范围宽二乙酰一肟-氨基硫脲（thiosemicarbazide）法氨基硫脲作用酸性试剂中的氨基硫脲与硫酸镉可促进尿素与双乙酰结合，提高灵敏度和显色后的稳定性。化学式CH5N3S结构式H2NNHCIISNH2起主要作用反应关系式022（NH2)2-C=O+2（NH2)2-C=S-----（NH2)2-C=C(NH2)2+SO2+S（尿素）（氨基硫脲）01原理尿素在氨基硫脲存在下，与二乙酰一肟在强酸环境中加热，生成红色的二嗪衍生物。显色强度在一定范围内与尿素含量成正比。01020304试剂二乙酰一肟溶液称取4.0g二乙酰一肟，溶解后加纯水至200ml，棕色瓶冷藏可保存半年。酸性试剂浓硫酸200ml与磷酸300ml混匀，冷至室温。加氨基硫脲50mg，硫酸镉2.0g溶解，棕色瓶冷藏至少可保存一年。尿素标准贮存液准确称取0.1000g尿素，加少量纯水溶解后，移至1000ml容量瓶中，加5滴三氯甲烷作防腐剂，用纯水定容至刻度。4℃保存，此溶液尿素浓度为0.1mg/ml。05尿素标准使用液临用时将尿素标准贮存液稀释10倍。此溶液尿素浓度10ug/ml。操作步骤1取水样10ml于具塞标准比色管中。另取比色管8只，分别加入10ug/ml的尿素标准使用液0、0.10、0.25、0.50、1.00、2.00、3.00、5.00ml，各加水至约10ml。每管各加酸性试剂5.0ml，2%的二乙酰一肟溶液2.0ml，加纯水至25ml。沸水浴12分钟，取出后用冷水冷却至室温。以空白管调零，在540nm处，用1cm比色皿测定各管吸光值。以浓度对照吸光值，制备标准曲线。以水样的吸光值在标准曲线上查出尿素含量。结果本法操作简便，溶液显色稳定，线性范围宽，试剂稳定时间长，适合平时工作中使用。作用作显色稳定剂。化学式（CH3）2CHOH结构式H3C异丙醇CHCH3IOH二乙酰一肟-异丙醇-安替比林法*尿素的测定尿素又称脲，是体内蛋白质分解代谢的含氮终产物，不与血浆蛋白结合，分子量仅为60，体内生成量受蛋白质摄入量，机体蛋白质分解代谢及肝脏（生成尿素的唯一器官）功能的影响。尿素是表明游泳池水受到人体污染程度的一项重要指标。简介二乙酰一肟（diacetylmonoxime）

法检测尿素（urea）含量01原理：尿素与二乙酰在酸性环境中加热可缩合成红色的二嗪衍生物，颜色深浅与尿素含量成正比。因二乙酰不稳定，故通常用二乙酰一肟代替，它与强酸作用，产生二乙酰。后者再与尿素反应，缩合生成红色的二嗪衍生物。02H+01二乙酰一肟+水→二乙酰+羟胺H+02二乙酰+尿素→二嗪化合物（粉红色）03临床二乙酰一肟法泳池二乙酰一肟法临床二乙酰一肟法测定尿素原理尿素与二乙酰一肟在酸性条件下，经镉离子（或三价铁离子）的催化产生缩合，并在氨基硫脲存在下，生成了4，5-二甲基-2-氧咪唑化合物，颜色深浅与尿素含量成正比。2试剂2．1酸性试剂：在1L容量瓶中加入蒸馏水约100mL，然后加入浓硫酸44mL及85%磷酸66mL，冷却至室温后加入硫氨脲80mg，硫酸镉2g，溶解后用蒸馏水稀释至1000mL，贮棕色瓶中放冰箱内保存半年不变。2．22%二乙酰一肟溶液：取2g二乙酰肟，溶于蒸馏水中，定容100mL混合均匀，即可使用。尿素使用液：取酸性试剂90mL加2%二乙酰一肟10mL，混合均匀即可。3方法3．1定性测定：取使用液2mL加入试管中，加0.1mL牛奶，在电炉上快速加热至煮沸，保持沸腾1min，观察颜色，用不含尿素样品做比较。正常奶颜色为淡红色，添加尿素的牛奶反应颜色为玫红色。3．2定量测定：取5mL使用液加入0.1mL牛奶，于20mL的螺口试管中，加盖拧紧，于95℃水浴中反应20min，过滤后，于525nm处测定吸光值。结果由于正常牛奶中含有少量的尿素，所以正常牛奶的反应试管也是有颜色的，由于尿素含量较少，所以颜色为淡红色。尿素含量异常的牛奶，反应后颜色为玫红色。两者的区别明显，在实际的质量控制中，应以正常奶做比较，来判断原料奶中尿素含量的水平，进而做出判断。优点：灵敏度