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单克隆抗体和多克隆抗体有很多区别
首先
1.制备上的区别
经过特定抗原处理过的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞通过细胞融合的方
法得到杂交瘤细胞,经HAT培养基筛选、ELISA检测效价后就得到阳
性克隆株,最后进行细胞培养或将细胞注入到动物(一般为balb/c
小鼠)腹腔中用腹水培养,收集上清/腹水纯化后就能得到单克隆抗
体。而制备多克隆抗体就没有单克隆抗体繁琐,只需将抗原(纯度越
高越好)直接注入到动物体内进行免疫,经过3~4次免疫,ELISA测
其效价合格后,收集血液离心得到上清,纯化后即能得到多克隆抗体。
因此制备多抗的周期就比单抗的短,首次制备价格也比单抗要低。
2.应用上的区别
单抗和多抗都有各自鲜明的特点与优势。单克隆抗体的特异性高,一
旦制备成功就可以永续的生产完全一致的抗体,因此可以对其特异性
进行全面、系统地验证。但如果所识别的抗原表位被破坏,实验的结
果将会受到很大的影响,这也是单抗的缺点之一。而多克隆抗体的特
异性较差,即使是使用相同的抗原制备多抗,不同批次间也会存在差
异,因而在特异性、一致性方面有很大的局限。所以在用多抗做免疫
检测时,更容易造成背景,例如在WB中有杂带,在IHC中背景较深
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等等。虽然还存在着交叉反应*的问题,但由于多抗识别多个抗原表
位,即使是有少数几个抗原表位被破坏或者抗原构象改变,实验的结
果也不会受到影响。在相同条件下,使用多抗可以提高检测的灵敏度,
对于丰度偏低的蛋白也更容易检出。
单抗与多抗的区别是什么
摘要:本文主要介绍了单克隆抗体与多克隆抗体的定义,并介绍单抗、
多抗在制备流程、特点及应用上的区别。
单抗与多抗的定义
抗原上可以引起机体产生抗体的分子结构叫做抗原决定簇,也称为抗
原表位。一个抗原可以有许多不同的抗原决定簇,因此,机体也可以
产生多种不同的抗体。由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅识别某
一特定抗原表位的抗体,称为单克隆抗体。而由多个B淋巴细胞克隆
产生的,受到多种抗原决定簇刺激并可以与多种抗原表位结合的抗体
就是多克隆抗体。从某种角度而言,多抗是多种单抗的混合物。
制备上的区别
经过特定抗原处理过的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞通过细胞融合的方
法得到杂交瘤细胞,经HAT培养基筛选、ELISA检测效价后就得到阳
性克隆株,最后进行细胞培养或将细胞注入到动物(一般为balb/c
小鼠)腹腔中用腹水培养,收集上清/腹水纯化后就能得到单克隆抗
体。而制备多克隆抗体就没有单克隆抗体繁琐,只需将抗原(纯度越
高越好)直接注入到动物体内进行免疫,经过3~4次免疫,ELISA测
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其效价合格后,收集血液离心得到上清,纯化后即能得到多克隆抗体。
因此制备多抗的周期就比单抗的短,首次制备价格也比单抗要低。
应用上的区别
单抗和多抗都有各自鲜明的特点与优势。单克隆抗体的特异性高,一
旦制备成功就可以永续的生产完全一致的抗体,因此可以对其特异性
进行全面、系统地验证。但如果所识别的抗原表位被破坏,实验的结
果将会受到很大的影响,这也是单抗的缺点之一。而多克隆抗体的特
异性较差,即使是使用相同的抗原制备多抗,不同批次间也会存在差
异,因而在特异性、一致性方面有很大的局限。所以在用多抗做免疫
检测时,更容易造成背景,例如在WB中有杂带,在IHC中背景较深
等等。虽然还存在着交叉反应*的问题,但由于多抗识别多个抗原表
位,即使是有少数几个抗原表位被破坏或者抗原构象改变,实验的结
果也不会受到影响。在相同条件下,使用多抗可以提高检测的灵敏度,
对于丰度偏低的蛋白也更容易检出。
如果对抗体的特异性要求高,用量较大或需要长期使用一致的抗体,
制备的抗体应用要求多(WB/IP/IF/ICC等),可以选择制备单克隆抗
体。若对抗体的特异性要求不高,需要做沉淀和凝集反应的检测性实
验或者只需做ELISA检测,可以选择制备多克隆抗体。
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单克隆抗体与多克隆抗体的对比表格
多克隆抗体单克隆抗体
对免疫免疫原纯度越高不纯的免疫原也能
原的要越好得到
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