病理HE染色控制.pptxVIP

汇报人：文小库2024-12-14病理HE染色控制

目录CONTENTSHE染色基本原理与步骤组织学样本制备与处理苏木精染色质量控制要点伊红染色质量控制要点HE染色结果评估与优化策略实验室安全与环保要求

01HE染色基本原理与步骤

定义苏木精—伊红染色法(hematoxylin-eosinstaining)，简称HE染色法。应用石蜡切片技术里常用的染色法之一，组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。HE染色法简介

苏木精染液为碱性，使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色；伊红为酸性染料，使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。染色原理苏木精染液与细胞核结合产生紫蓝色，伊红染液与细胞质结合产生红色。化学反应染色原理及化学反应

操作步骤切片脱蜡至水、染色、分化、漂洗、脱水、透明、封片等步骤。注意事项切片厚度要适宜，染色时间要恰当，分化程度要控制，漂洗要充分，脱水要彻底。操作步骤与注意事项

可能是切片厚度不均或染色时间不一致，需重新切片或调整染色时间。染色不均可能是染色时间过长或分化不足，需缩短染色时间或加强分化。染色过深可能是染色时间过短或伊红浓度过低，需延长染色时间或增加伊红浓度。染色过浅常见问题及解决方案010203

02组织学样本制备与处理

样本采集遵循临床需求，确保采集的样本具有代表性，避免过度损伤组织。固定方法选择合适的固定液，常用的有甲醛、戊二醛等，确保样本在固定过程中形态和结构不发生变化。样本采集与固定方法

脱水、透明和浸蜡过程脱水使用不同浓度的乙醇逐步去除组织中的水分，防止在浸蜡时产生气泡。使用二甲苯等透明剂使组织透明，便于浸蜡。透明将透明后的组织浸入石蜡中，使其充分浸透并包埋。浸蜡

将浸蜡后的组织放入模具中，冷却后制成蜡块，方便切片。包埋使用切片机将蜡块切成薄片，注意切片的厚度和完整性，避免切片过厚或过薄。切片包埋和切片技巧分享

样本保存与运输要求运输要求在运输过程中，要注意防震、防潮、防压，确保切片的完整性和质量。样本保存将切片保存在干燥、避光、防潮的环境中，避免切片变形或褪色。

03苏木精染色质量控制要点

根据组织类型和染色需求选择合适的苏木精染液配方。配方选择精确称量染料和相关试剂，按照配方进行配制，确保溶液浓度和稳定性。配制过程根据染色效果和实验需求，可适当调整苏木精染液的浓度、PH值和染色时间等参数。调整方法苏木精染液配制及调整策略010203

染色时间染色时间过短会导致细胞核着色不足，过长则会导致染色过深，影响观察效果。需严格控制染色时间。染色温度染色温度过高会加速染料扩散和化学反应速度，导致染色过深或染色不均匀；温度过低则会导致染色速度过慢。需根据实验室条件和染色需求选择合适的染色温度。染色时间、温度对结果影响分析

细胞核应呈现深蓝色或蓝黑色，着色强度需适中，过深或过浅均不利于观察。着色强度着色均匀性对比度细胞核着色应均匀一致，无明显深浅不一或着色不均现象。细胞核与周围组织的对比度需明显，便于观察和诊断。细胞核着色效果评价标准

染色过浅若细胞核着色过浅，可适当延长染色时间或增加染色液浓度。同时需确保染色液的有效性和稳定性。染色不均若染色过程中出现染色不均现象，需及时调整染色液浓度或重新进行染色。染色过深若细胞核着色过深，可采用盐酸酒精分化或高浓度酒精脱色等方法进行处理。异常情况处理措施

04伊红染色质量控制要点

选择合适的溶剂配制伊红染液，如醇溶性伊红需用无水乙醇溶解。溶剂选择按照比例准确配制伊红染液，避免浓度过高或过低影响染色效果。配制方法选择纯度高的伊红染料，确保染色效果稳定。染料选择伊红染液选择及配制方法

根据组织类型和厚度，合理控制染色时间，确保细胞质充分着色。染色时间通过调整伊红染液的pH值，可改变染色效果，一般控制在酸性范围内。pH值调整染色温度对染色效果也有一定影响，需控制在适宜范围内。染色温度染色时间、pH值调整技巧

细胞质着色效果评价标准着色均匀度细胞质着色应均匀，无明显深浅不一的现象。细胞质着色强度应适中，既能清晰显示细胞结构，又不影响细胞核的着色。着色强度细胞质着色后应呈现鲜艳的红色，无色差或暗淡现象。色彩鲜艳度

05HE染色结果评估与优化策略

观察染色是否均匀，有无斑点、深浅不一等现象。染色均匀性评估评估组织结构的保存情况，包括细胞形态、细胞间关系等。结构保存评括细胞核、细胞质、细胞外基质的着色程度和清晰度。染色质量评估评估不同组织成分之间的颜色差异是否明显。染色对比度评估染色结果评估指标及方法

染色时间时间过长或过短都会影响染色效果，需根据组织类型和染色剂种类进行优化。染色剂浓度浓度过高或过低都会影响染色质量和对比度，需进行适当调整。组织处理组织固定、脱水、透明等处理不当会影响染色效果，需优化处理流程。染色操作操作不当如