常见病原性球菌—链球菌属的检验（微生物检验技术）.pptx

;;链球菌属细菌为一类触酶阴性的革兰染色阳性球菌，广泛分布于自然界、人及动物肠道和健康人鼻咽部。;1.形态与染色G+球菌，直径0.5～1um。

（1）液体培养基中链状排列，长短不一。短由4～8个菌组成，长者可达20～30个细菌组成。

（2）在固体培养基或脓汁标本中，呈短链、成双或单个散在排列。;链球菌幼龄时可见荚膜，继续培养荚膜消失。

肺炎链球菌常常呈双排列，故又称为肺炎双球菌。在动物体内它可形成较厚的荚膜。

链球菌属无鞭毛、无芽胞。;2.培养特性营养要求高，兼性厌氧菌，在含葡萄糖、血清、血液培养基中生长良好。最适pH值7.4～7.6，温度35～37℃（22～42℃）。在5%～10%CO2环境下生长更好。;α-溶血β-溶血γ-溶血;（1）A群链球菌：杆菌肽S;3.生化反应;3.生化反应;4.分类根据下述链球菌的溶血特征和Lancefield血清学等传统的分类法，目前仍然是临床实验室鉴定链球菌的常规使用方法。;3）丙型链球菌（无溶血环）（溶血链球菌或不溶血性链球菌）：亦称γ-溶血现象。菌落较甲链、乙链大，不溶血。;（2）根据抗原结构分类：链球菌Ag结构较复杂，含多种抗原，主要有：

1）多糖抗原（群特异性抗原）：位于细胞壁上，Lancefield将乙链（溶血性）分成A、B、C、D等20个群。

链球菌Ag群中，对人类致病者90%属A群，B、C、D、F、G群也常感染致化脓性疾患。

2）蛋白抗原（型特异性抗原）：位于菌体表面，有M、T、R和S蛋白。

3）核蛋白抗原（P抗原）;（3）根据链球菌对氧的需求分为三类：需氧、厌氧、微需氧链球菌，还有噬菌体及细菌素分型等方法。;5.抵抗力对外界抵抗力不强，对各种的常用消毒剂均很敏感，60℃30min即可将其杀死。对红霉素、霉素、氯霉素、磺胺等药物均敏感。;1.致病物质

（1）酶和菌体成分：①透明质酸酶：又称扩散因子；②链激酶：溶纤维蛋白酶；③链道酶：脱氧核糖核酸酶；④M蛋白：引起超敏反应的异嗜性抗原。;;;D群链球菌也称为肠球菌所致的感染中最常见者为尿路感染，其中大部分为医院感染，多与尿路???械操作、保留导尿管和病人的尿路结构异常等有关。其次为腹部和盆腔等部位的创伤和外科术后感染。;微生物检验程序;1.标本采集：根据临床症状及体征采集标本，如血液、尿液、创伤标本、脓性分泌物等。;增菌液中生长现象：

A．产生β-溶血的链球菌：沉淀生长，从下而上的溶血现象。

B．产生α-溶血的链球菌：混浊生长，产生草绿色荧光。

C．D群链球菌：混浊生长。

D．厌氧链球菌：在疱肉基中生长呈混浊现象。;2）血平板：培养条件：需加血清、血液等营养物质。

培养基—羊血平板（有助于其溶血特征的识别和进一步鉴定）。初代分离应置5％～10％的二氧化碳环境下培养。如采用二氧化碳孵箱或烛缸。

需氧、厌氧各一块培养经37℃培养1～2天。观察菌落特征、溶血现象。;4．鉴定实验链球菌属的细菌的鉴定应根据其菌体形态、菌落形态和溶血特征，结合以下鉴定试验进行。;3）多糖抗原分群（群特异性抗原）;乙型溶血性链球菌鉴定种，鉴定到抗原群（A、B、C、G）;2类：胆汁七叶苷水解阳性

鸟链：Q群+，其它D群+

青霉素6.5%NaCL肉汤生长

D群链球菌S-

肠球菌R+;（3）其他鉴定试验：

1）链激酶：A群+

2）牛乳美蓝试验：粪链、乳链不被抑制

3）马尿酸钠水解试验：B群+

4）肺炎链球菌：荚膜肿胀试验+;A群：杆菌肽，链激酶为+

B群：黄色素产生，CAMP、马尿酸盐分解均+

D群：胆汁七叶苷，七叶苷+，PYR+

G群：七叶苷，SXT，链激酶均+。