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弯曲菌属与螺杆菌属的检验(微生物检验技术).pptx

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;弯曲菌属(Campylobacter)细菌是一类微需氧、不分解糖类、氧化酶阳性、菌体弯曲呈逗点状、S型或螺旋状、有动力的革兰氏阴性菌。

广泛分布于动物界,其中有些可引起动物和人类腹泻、胃肠炎和肠道外感染。;形态染色;弯曲菌属;培养特性;生化反应

该菌属生化反应不活泼。不分解糖类、不液化明胶、不分解尿素,V-P和甲基红试验均阴性。氧化酶均为阳性,大多数弯曲菌还能还原硝酸盐,触酶试验为阳性,空肠弯曲菌马尿酸水解试验阳性。

抗原结构有O抗原、热不稳定抗原和H抗原。根据O抗原可将空肠弯曲菌分为42个血清型。

抵抗力较弱,56℃5分钟即被杀死。干燥环境中仅能存活3小时。常对红霉素、克林霉素和四环素敏感,多数空肠弯曲菌对氨基糖甙类、氯霉素及氟喹诺酮类敏感,由于可产生β-内酰胺酶,一般对β-内酰胺类药物耐药。

;弯曲菌属临床意义;微生物学检验;(3)分离培养:常用的培养基有改良弯曲菌培养基(Campy-BAP)。在Campy-BAP上,经48小时孵育,可形成2种形态的菌落:

一种为扁平、湿润、灰或蓝灰白色、边缘不整齐、常沿接种线扩散生长的菌落;

另一种为圆形、凸起、湿润、周围有黏液样外观、直径1~2mm、不溶血的菌落。在布氏肉汤内呈均匀混浊生长

(4)生化反应:氧化酶和触酶试验阳性,能还原硝酸盐。不分解和不发酵糖,不分解尿素。

(5)免疫学试验:特异性抗体包被乳胶颗粒,可鉴定空肠弯曲菌和大肠弯曲菌。

;(2)种和亚种鉴定:见表;鉴定要点

标本采集:粪便,肛拭,剩余食物,立即送检

镜检:

悬滴法动力检查观察投标样或螺旋动力

染色检查:革兰阴性细小弯曲菌

培养:微需氧、温度生长试验;弯曲菌属温度生长试验;幽门螺杆菌;人胃活检黏膜组织涂片革兰染色(幽门螺杆菌);复活节---发现幽门螺杆菌的曙光!;

;Hp是一种单极、多鞭毛菌,末端钝圆;在胃黏膜上皮表面,胃小凹内及腺腔内,

呈不均匀的集团状分布;螺杆菌是一群氧化酶和触酶阳性,微需氧、37℃能生长,在25℃和42℃生长不良的革兰阴性无芽胞的弯曲菌。目前研究的最多的是幽门螺杆菌(Hp)

过氧化氢酶和氧化酶阳性。尿素酶丰富???是鉴定的主要依据之一。

;临床意义;微生物学检验;;细菌的直接检查

通过胃镜钳取胃粘膜作直接涂片、染色,组织切片染色及细菌培养来检测幽门螺旋杆菌。

其中细菌培养是诊断的最可靠方法,可作为验证其他诊断性试验的“金标准”。

尿毒酶检查

幽门螺旋杆菌是唯一能够通过人胃内保护屏障的细菌。

尿毒酶分解胃内尿毒生成氨和CO2,使尿素浓度降低、氨浓度升高。

;免疫学检测

测定血清中的幽门螺旋杆菌抗体来检测幽门螺旋杆菌感染,包括补体结合试验、凝集试验、被动血凝测定、免疫印迹技术和ELISA测定等。

PCR检查

该方法具有敏感度高、特异性强的优点。用核酸探针检测HP,合成的寡核酸探针顺序同HP的16SrRNA顺序互补,以检测HP的存在。此法敏感性和特异性均高。

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