弧菌科检验技术（微生物检验技术）.pptx

;案例导学;一．弧菌科的共性：

1．G－菌，菌体短小，弯曲成弧形或直杆状。无芽胞，营养要求不高，抵抗力不强，可致肠道及肠外感染。

2．有动力——鞭毛。

3．氧化酶+(麦氏弧菌除外)，与肠杆菌科鉴别。

4．利用葡萄糖为发酵型，与非发酵菌鉴别。;肠杆菌科、弧菌科、非发酵菌的主要区别;三．所致疾病：

致病性弧菌引起人类感染主要有两种形式：

（一）肠道感染，引起胃肠炎或腹泻如霍乱弧菌、副溶血性弧菌、河弧菌等。

（二）非肠道感染：败血症、中耳炎、伤口感染等。

有些弧菌可引起上述两种类型的感染

如霍乱弧菌还可引起败血症、中耳炎、伤口感染；

副溶血性弧菌除引起食物中毒外，还可引起败血症；

气单胞菌属和邻单胞菌属可引起腹泻、肠炎、伤口感染，并可侵入血流引起败血症、脑膜炎或骨髓炎。;;弧菌属分布广泛，以淡水及海水最多。

根据细菌的抗原性、生化反应、DNA同源性、致病性及耐盐性等不同，将弧菌分为4类：

O1群霍乱弧菌

不典型O1群霍乱弧菌

非O1群霍乱弧菌

其他弧菌（副溶血性弧菌）

本属细菌共36种，多数为非致病菌。对人类致病的主要有霍乱弧菌和副溶血性弧菌，分别引起霍乱和食物中毒。

;霍乱弧菌概述;3．第8次(1992年10月起在印度和孟加拉国等南亚国家暴发的世界性大流行)：由O139血清型霍乱弧菌引起的。它既不属于O-1群霍乱弧菌的两个生物型，也不属于以前的非O-1群霍乱弧菌的血清群，而是一种新的霍乱弧菌的血清群，由于该菌不属于霍乱弧菌已知的138种血清型的任何一型，故称为O139。

用Y1细胞和兔肠段结扎试验证明该菌也产生CT，且该毒素氨基末端的序列与EL-Tor弧菌同源，提示这种新血清型可能是EL-Tor菌株的O抗原突变株。;一、临床意义

（一）所致疾病：霍乱是国际检疫的甲类传染病。（O1群、O139群）

（二）致病物质

1．侵袭力：借助鞭毛、菌毛和分泌粘液的能力穿过肠道粘液层，并粘附于微绒毛上。

2．霍乱肠毒素是引起霍乱的主要致病物质，近年来还有多种毒素如类志贺毒素和可溶性血凝素。

;;二、特点：

1．呈直线穿梭状或??星状运动，且制动试验阳性，因有一根极端单鞭毛。

2．人米泔水样粪便直接镜检：G-弧菌，呈鱼群样排列。

3．兼性厌氧菌，耐碱不耐酸。

4．营养要求不高。

5．有耐碱性，可高达9.0。为了抑制其它细菌生长，通常选用pH8.4~8.6碱性蛋白胨水作为增菌培养基，常选用TCBS为分离培养用选择性培养基。

;霍乱弧菌;霍乱弧菌鞭毛电镜图;霍乱弧菌

菌体电镜图;6.在各培养基中的生长情况及菌落特征：

（1）在碱性蛋白胨水中，生长迅速，37℃培养6-9小时，在液体表面大量繁殖形成菌膜，液体呈均匀混浊。培养时间延长，菌膜增厚，最后沉于管底。;（2）TCBS(硫代硫酸钠-枸橼酸盐-胆盐-蔗糖)琼脂平板：黄色菌落(发酵蔗糖产酸所致)。;（3）糖双洗琼脂或庆大霉素琼脂(含亚碲酸钾培养基1:20万)：菌落中心呈灰褐色。（还原亚碲酸钾为金属碲）PS:还有哪个菌能还原亚碲酸钾为金属碲？;（4）血平板(BAP)：菌落较大，EL-Tor生物型可形成β-溶血。

（5）碱性琼脂平板上，形成较大、圆形、扁平、无色透明或半透明似水滴状菌落。

（6）SS平板上不生长，在MAC平板上多可生长。;7.生化反应;8．抗原结构与分型：;O1群根据其菌体抗原含有A、B、C3种抗原因子不同，又可分三个血清型。;根据生物学特性的差异，霍乱弧菌分为两个生物型（抗原类型都属于O1群）：;霍乱弧菌;霍乱弧菌;三、微生物学检验

注意点：

1．早期发现，用药前采集标本，及时送检。

2．勿污染杂菌、外界，勿用消毒水。

3．快而准确的报告。;标本（米泔水样便、呕吐物）;（一）快速诊断：

1．直接涂片革兰染色镜检：鱼群状排列的G—弧菌

2．悬滴法观察动力：穿梭或流星样运动;（三）血清学鉴定

确定血清群：取可疑菌落与O1群多价抗血清做凝集试验，确定属于01群群还是非O1群霍乱弧菌

确定血清型：属于O1群，再取菌分别与O1群单价分型血清A、B、C做凝集试验;3.生物分型：根据生物学特性，做生化试验，确定是古典生物型还是El-Tor生物型;补充：防治原则

1.控制传染源

2.切断传播途径：