人类疾病动模型评估及分类.ppt

猪血清模型与白蛋白模型相比指标猪血清模型白蛋白模型方法简单复杂价格经济较贵出现率86.7%77.7%死亡率040%/31.6%周期28d95d化学性损伤法：雄性Wistar大鼠，体重130g左右，用硫代乙酰胺腹腔内注射，第1次20mg/100g体重，从第二次起12mg/100g体重，每周注射2次，共8周。评价:第3周，在肝小叶间中间带出现大片的肝细胞变性坏死和炎细胞浸润，炎细胞浸润、坏死细胞数和程度超过猪血清模型。6周后出现增生纤维束，纤维增生晚于和少于猪血清模型。大鼠肝纤维组织中有I型胶原的mRNA增多。180～200gWistar或SD大鼠，皮下注射40%-50%CCl4，油溶液(0.3ml/100g)，每周2次，第2周始，隔日以20％-30％酒精lml灌胃(或作为唯一饮料)，饲以单纯玉米面(混以0.5％胆固醇)，共10周。评价：第2周出现小叶中心小片状肝细胞变性坏死，第4周开始有较薄的纤维间隔形成，第6周肝脏间隔进一步增厚，有假小叶形成：第8周形成厚的纤维间隔，分割形成假小叶。大鼠成活率60%-80%。该模型是目前国内外常采用的动物模型，可靠且复制时间短，肝纤维化进展稳定，适合于肝硬化过程的动态研究。四氯化碳法：02主动免疫致敏动物模型：利用哺乳类大动物(如狗、羊和猴)在自然状态下感染线圆虫类寄生虫(主要是蛔虫)，血清中长期存在高滴度的抗某一寄生虫抗原的特应性抗体(IgE)，再次受到这一寄生虫抗原的攻击，即迅速地产生抗原抗体反应，并使呼吸道产生支气管嗜喘反应；03被动免疫致敏动物模型：在实验前，用特殊的抗原及免疫辅佐剂注入动物体内，使动物致敏后，制备抗血清输入动物使其被动致敏，再用同一抗原进行攻击建立哮喘模型。支气管哮喘动物模型大鼠、豚鼠和狗最常用。根据制模方式可分为：01卵白蛋白激发哮喘模型造模机制：过敏原卵白蛋白注入豚鼠体内，其可溶性抗原刺激机体产生IgE抗体，使机体处于致敏状态。当豚鼠再次接触此抗原时，IgE介导发生抗原抗体反应，使细胞脱颗粒，释放出活性化学物质如组胺、嗜酸性粒细胞趋化因子等，作用于支气管引起气道高反应致哮喘。0102造模方法：豚鼠：200～300g豚鼠，第1天和8天，0.5％卵白蛋白溶于生理盐水10ml加至超声雾化吸入器，用简易面罩雾化吸入10min，第16—20天将致敏动物置于密闭的容器内，用1％卵白蛋白气雾激发，使动物暴露在卵白蛋白气雾中10～30min，至出现哮喘样发作。评价：出现咳嗽、烦躁、口唇和四肢紫绀，呼吸费力。生理记录仪描记呼吸曲线，出现呼吸频率加快和呼吸加深。病理检查发现毛细血管扩张，嗜酸性粒细胞浸润，腺体分泌活动亢进。该模型是国内外常用的方法，方法简单，复制性强，且豚鼠是最好的显示气道高反应型的特征动物，其哮喘发作与人表现相似。主要用于哮喘发病机制的研究和治疗观察。大鼠：4～6周龄120～180g雄性SD大鼠，，腹腔注射卵白蛋白100mg抗原液1ml，灭活百日咳杆菌疫苗5×109个和氢氧化铝干粉100mg致敏。2周后用超声雾化器向箱内喷雾1％卵白蛋白，吸入20min激发。评价：表现呼吸气促，严重者呼吸减慢或节律不齐、轻度紫绀、四肢瘫软、行动迟滞或俯伏不动、反应迟钝，连续激发后大鼠体重减轻、毛色失去光泽、反应迟钝。本模型适用于特异性抗原抗体反应的研究，有速发和迟发双相反应。邻苯二甲酸酐(PA)致变应性哮喘模型机制：苯酐是小分子化合物，属半抗原。由于半抗原不能刺激机体产生免疫反应，故需与蛋白结合成全抗原，形成新的抗原决定簇而发挥致敏作用。据此实验制备了两种不同载体的苯酐全抗原即PA-HAS和PA-BSA。用致敏的抗血清给正常动物注射使其致敏，并在相应抗原吸入攻击下同样可诱发出哮喘。方法：2-3月龄250—300g豚鼠。用30mg苯酐以lml丙酮溶解后，加入4℃2％HAS9%碳酸氢钠溶液中，并搅拌1h形成PA—HSA。同法制备PA—BSA。将制备的抗原与弗氏完全佐剂等量研磨，使之成油包水状。腹腔或后腿肌肉注射0.2～0.3ml/只(含蛋白4-6mg)。注射3～8周后抗原吸入激发。动物俯卧固定，激发前描记正常的呼吸曲线。用1:1000HSA盐水溶液雾化后吸入1～3min，观察记录0.5h。豚鼠吸入抗原后1-10min内，表现为呼吸频率加快，由100—120次/min增加到140～160次/min；呼吸幅度增大，同时伴有咳嗽、喷啑，重者呼吸极度费力、挣扎，有短暂窒息甚至死亡。发作一般持续30～50min。PA是确切的职业性致喘物质。苯酐哮喘属变应性哮喘，患者体内可测出特异性抗体，苯酐抗原吸入激发试验常呈现阳性。本模