2025年烟草青枯病离体接种的人工发病方法与相关技术 .pdfVIP

吾日三省乎吾身。为人谋而不忠乎?与朋友交而不信乎?传不习乎?——《论语》

图片简介:

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本技术介绍了一种烟草青枯病离体接种的人工发病方法，该方法步骤如下：）接种用主要

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器具准备；）烟苗培育；）接种用细菌液的准备；）离体叶片的采集；）离体叶片的处

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置；）接种病菌；）接种后处置。本技术的优点是：本技术所用器具简单，接种发病过

2.

程时间短，占用空间场地少，方法简易便捷，无需高难度的技术操作，工作效率高；本技

术利用较小的烟叶，烟苗的培育准备快速易行；发病症状与田间症状一致，清晰易识别，重

现性好，接种发病局部条件容易控制，容易实现技术方法的标准化。

技术要求

1.一种烟草青枯病离体接种的人工发病方法，其特征在于，在倾斜的培养

皿内将烟草离体叶片接种烟草青枯病菌，导致叶片的叶脉组织坏死而表现出清

晰的发病症状；

人工发病方法的步骤如下：

1）接种用主要器具准备：用普通培养皿作接种用主要器具，清洁消毒后

备用；

2）烟苗培育：按常规方法培育烟苗，常规水肥管理，直至烟苗叶片长度

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与步骤）的培养皿直径相近时，即可使用；

士不可以不弘毅，任重而道远。仁以为己任，不亦重乎?死而后已，不亦远乎?——《论语》

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）接种用细菌液的准备：将烟草青枯病菌移植到一般细菌培养基平板

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上，培养基的成分：牛肉膏克，蛋白胨克，琼脂克，蔗糖克，

1000ml3048

水，℃培养小时后，用无菌水将培养基平板上生长的细菌菌落

洗涤悬浮，并将此细菌悬浮液转入干净的容器内，用无菌水调配成细菌浓度为

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2.5×10cfu/ml，作接种用细菌液；

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）离体叶片的采集：用干净剪刀，剪取步骤）烟草植株上的叶片长度

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与步骤）的培养皿直径相近的叶片，用干净的容器装回室内，在自来水下轻

轻冲洗干净叶片表面后待用；

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）离体叶片的处置：将步骤）备好的培养皿倾斜放置，打开皿盖，取

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步骤）准备的离体叶片展开放入培养皿内，叶片的顶端置于倾斜培养皿的高

处，叶片的基端置于培养皿的最低处，并用一段干净灭菌的短玻璃棒将叶片的

基端压住，每培养皿放一片叶片；

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）接种病菌：取步骤）准备的接种用细菌液注入步骤）的放有离体叶

片的培养皿内，使细菌液浸没叶片基部，盖回培养皿盖；

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）接种后处置：将步骤）的带有叶片和细菌液的培养皿置于具备正常散射

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光的普通室内培养，培养温度维持在～℃；

接种结果导致叶片出现非常清楚的叶脉坏死以及脉间组织的坏死症状，一

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般接种后天开始表现症状，～天后整个叶片全部坏死。

说明书

一种烟草青枯病离体接种的人工发病方法

技术领域

本技术涉及农业技术和生物技术。具体是一种烟草青枯病离体接种的人工

发病方法。

背景技术

人人好公，则天下太平；人人营私，则天下大乱。——刘鹗

在植物病害控防研究中，许多基础问题的研究或重要理论问题的研究均离

不开人工接种发病这基本手段。植物病害人工发病可以在活体植株上接