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ABB色谱分析仪的运行及标定

一、ABB色谱分析仪的运行准备

(1)在进行ABB色谱分析仪的运行准备阶段，首先需要对仪器进行彻底的检查，确保所有部件均处于良好的工作状态。这包括检查仪器的外壳是否有损伤，连接电缆是否完好无损，检测器、进样阀、柱温箱等关键部件是否运转正常。此外，还需确认仪器的软件系统版本是否更新至最新，以确保系统稳定性和数据准确性。在进行检查的同时，对仪器的操作环境也要进行评估，确保实验室的温度、湿度等条件符合色谱分析的要求。

(2)在仪器检查无误后，接下来是准备色谱分析所需的样品。样品的制备过程需要严格遵循实验规范，包括样品的采集、处理、储存和前处理。样品采集过程中要避免污染，确保样品的代表性。处理样品时，需要根据样品的特性和分析需求选择合适的前处理方法，如稀释、过滤、衍生化等。对于复杂样品，可能需要多步前处理来提高分析结果的准确性。在样品制备完成后，需要对样品进行适当的保存，以防止样品发生变化影响分析结果。

(3)样品准备就绪后，接下来是色谱仪器的系统设置。这包括设置合适的流速、柱温、检测器温度等参数。流速的选择应考虑样品的性质和色谱柱的特性，以确保分离效果。柱温是色谱分析中的关键参数，它对分离度和峰形有重要影响。检测器温度的设定同样重要，不同的检测器对温度的要求不同，需要根据具体型号进行调整。此外，还需设置合适的进样量和进样时间，以确保样品能够顺利进入色谱柱，并减少峰展宽。在进行系统设置时，要仔细查阅仪器手册，确保参数设置的正确性。

二、色谱仪器的操作步骤

(1)操作色谱仪器前，首先需确保所有设备连接正确，包括电源、气源、数据采集系统等。例如，在启动HP1100型高效液相色谱仪时，需要先打开电源，确保高压泵、检测器、色谱柱等部件都已连接到位。在设置流速时，通常将流速设置为1.0mL/min，以获得良好的分离效果。例如，在分析某药物成分时，流速设置为1.2mL/min，通过优化分离条件，成功将药物成分与其他杂质分离。

(2)接下来，进行样品进样操作。首先，将样品用微量注射器注入进样阀。以Agilent1200型高效液相色谱仪为例，进样体积通常为20μL。在进样过程中，需注意控制进样速度，避免样品过度稀释或过度浓缩。例如，在分析某生物样品时，由于样品中含有大量蛋白质，进样速度被设置为0.5mL/min，以减少蛋白质的聚集和峰展宽。进样完成后，记录进样时间，以便后续数据分析。

(3)在色谱仪运行过程中，需实时监控分析数据。以ThermoFisherScientific的UPLC系统为例，在分析某食品添加剂时，通过设置检测器波长为254nm，监测样品中目标物质的保留时间和峰面积。在分析过程中，发现保留时间约为5.0分钟，峰面积与标准曲线的相关系数为0.999。根据此结果，可以计算出样品中目标添加剂的含量，例如，若标准曲线表明每单位峰面积对应10mg/L的添加剂，则样品中添加剂含量为50mg/L。在分析结束后，关闭仪器，进行数据整理和报告撰写。

三、色谱数据的采集与分析

(1)色谱数据采集是色谱分析的重要环节，它涉及到样品的分离、检测和记录。在采集数据时，首先要确保色谱仪运行稳定，所有参数设置正确。以气相色谱为例，需要调整合适的载气压力和流速，确保样品能够顺利通过色谱柱。在液相色谱中，则要精确控制流动相的组成、流速和柱温。以某农药残留分析为例，使用高效液相色谱-质谱联用技术，通过设置流动相为乙腈-水，流速为1.0mL/min，柱温为30°C，成功采集到农药残留物的色谱图。采集过程中，实时监控色谱峰的形状、保留时间和峰面积，这些数据将用于后续的分析和定量。

(2)数据采集完成后，接下来是色谱数据的分析阶段。首先，对采集到的色谱图进行峰识别，通过比较保留时间和已知物质的保留指数，确定每个色谱峰所代表的物质。例如，在分析某生物样本时，通过比对保留时间和标准品，识别出三个色谱峰分别对应三种不同的蛋白质。接着，对每个色谱峰进行定量分析，通常采用峰面积或峰高作为定量依据。在定量过程中，需要建立标准曲线，以确定样品中目标物质的浓度。以某药物含量测定为例，通过制备一系列已知浓度的标准溶液，绘制标准曲线，发现线性范围为5-50μg/mL，相关系数为0.999。

(3)色谱数据的分析还包括对实验结果的验证和报告撰写。验证过程可能包括重复实验、平行实验以及与其他分析方法的结果对比。例如，在分析某环境水样中的重金属含量时，除了使用色谱法，还进行了原子吸收光谱法的对比实验，以验证色谱分析结果的准确性。在撰写报告时，需要详细记录实验方法、数据分析过程、结果和结论。报告中的数据应准确无误，图表清晰，以便于同行评审和结果交流。此外，报告还应包含对实验过程中可能出现的误差和不确定性的讨论。

四、ABB色谱分析仪的