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玉米高粱主要病害抗病性鉴定技术规范第9部分：玉米北方炭疽病

1范围

本文件规定了玉米北方炭疽病（Kabatiellazeae）抗病性鉴定的准备、接种、调查、抗性评价和鉴定结果汇总等技术内容。

本文件适用于栽培玉米（ZeamaysL.）种质资源和品种对玉米北方炭疽病抗性的鉴定及评价。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

DB21/T2219.8玉米高粱主要病害抗性鉴定技术规范第8部分：玉米木霉穗腐病。3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4准备

4.1接种物

4.1.1病原物的分离、鉴定和保存4.1.1.1分离

从田间采集具有典型玉米北方炭疽病症状的叶片，以组织分离法从病斑上分离病原物后，再利用单孢分离法获得纯化培养物。

4.1.1.2鉴定和保存

纯化培养物经形态学特征和分子生物学鉴定结果将其确定为玉蜀黍球梗孢（见附录A）。待纯化菌株菌落长至1/2培养皿（90mm）时，用马铃薯葡萄糖培养液（PotatoDextrose，简称PD）洗下分生孢子，过滤后获得分生孢子悬浮液与50%甘油1:1比例混匀，-80℃保存备用。PD的配制应符合DB21/T2219.8的规定。

4.1.2接种物的制备4.1.2.1培养基配制

接种前需配制马铃薯葡萄糖琼脂（PotatoDextroseAgar，简称PDA）培养基和玉蜀黍球梗孢培养基（Kabatiellazeaemedium，简称KZM）。KZM的配制方法：选取羧甲基纤维素10g+麦芽糖5g+蛋白

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胨1.5g+磷酸二氢钾1g混合加入1000mL蒸馏水定容，分装后121℃高压灭菌30min。PDA的配制应符合DB21/T2219.8的规定。

4.1.2.2接种物获取

将保存菌株接种于PDA培养基，25℃黑暗条件下培养7d后，用无菌打孔器获取菌落直径为6mm的菌饼，将其接种于KZM培养基，接种前培养物经三层已灭菌纱布过滤，获得分生孢子悬浮液，用无菌水将分生孢子的浓度调至1×106个/mL，加入0.01%吐温20，即可用于田间接种。

4.2鉴定圃

4.2.1圃地选择

应选择土壤肥力中等以上，具有良好自然发病环境和排灌设施的地块。

4.2.2试验设计

鉴定材料随机排列或顺序排列。进行品种抗病性鉴定时，每30行鉴定材料设1组已知抗病和感病对照材料（见附录B）；进行种质资源抗病性鉴定时，每50行鉴定材料设1组已知抗病和感病对照材料。圃地周边应设置保护行。

4.2.3种植要求

鉴定材料播种时间、方式与生产田相同。鉴定小区行长3m，行距与植株密度根据各区域品种试验要求确定，条播或穴播，每行保苗13株～15株。种质资源鉴定种植2行，品种鉴定种植4行。土壤肥力水平和耕作管理方式与生产田相同。

5接种

5.1接种时期

玉米心叶末期。接种时宜选择在阴天或雨后傍晚。

5.2接种方法

采用喷雾接种法。将接种物均匀喷雾于植株叶片上，接种量为8mL/株～10mL/株。

5.3接种前后的田间管理

鉴定材料全生育期不施杀菌剂，同一项操作在同一天完成。要保持田间大气湿度，若遇干旱天气，应及时田间浇灌，满足发病条件。

6调查

6.1调查时间

玉米乳熟末期。同批次接种材料应在同一天完成。

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6.2调查方法

目测每份鉴定材料群体发病情况。逐株逐叶调查，重点部位为玉米果穗上、下方各3片叶，根据症状描述，记录每份材料病情级别。病情分级、相对应的症状描述见表1。

表1玉米对北方炭疽病抗性鉴定的病情级别划分

病情分级

症状描述(病斑面积占叶片面积比例)

1

A≤5%

3

5%＜A≤10%

5

10%＜A≤30%

7

30%＜A≤70%

9

A＞70%

注：病斑面积占叶片面积比例以A表示。

7抗性评价

7.1鉴定有效性判别

当设置感病对照材料平均病情级别≥5.6时，该批次鉴定判定有效。

7.2抗性评价标准

计算每份鉴定材料的平均病情级别，并依据平均级别确定该鉴定材料对北方炭疽病的抗性。抗性的划分标准见表2。

表2玉米对北方炭疽病抗性评价标准

平均病情级别

抗性

D≤1.5

高度抗病Highlyresistant（高抗HR）

1.5D≤3.5

抗病Resistant（抗R）

3.5D≤5.5

中度抗病Moderatelyresistant（中抗MR）

5.5D≤7.5

感病