菊花的组织培养.ppt

用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数为70％的酒精中摇动2－3次，持续6－7s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗.取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入质量分数为0.1％的氯化汞溶液中1－2min，取出后在无菌水中至少清洗3次，漂净消毒液.③消毒液处理②酒精处理接种室消毒污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种室消毒是至关重要的。用70％的酒精喷雾使空气消毒，酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射20分钟无菌操作要求操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后，都需要用火焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。（三）接种3、材料的切取和接种将装有培养基的锥形瓶整齐地排列在酒精灯左侧。将消过毒的菊花茎段在无菌培养皿中切成小段（长约0.5-1cm）。左手持锥形瓶。右手拉开捆扎锥形瓶的绳子，并将封口膜攥在右手手心，以避免封口膜接触瓶口的一面被污染。左手持瓶，使瓶口旋转通过火焰，右手用镊子夹取菊花茎段，放入培养基中。插入时应注意不要倒插。每瓶接种6－8块外植体。接种后，将封口膜重新扎好每接种一块外植体前，镊子需放入体积分数为75％的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精灯火焰上烧一遍，冷却后再接种.外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定，一般胡萝卜3－4块，菊的茎或叶6－8块，也不要太少，以充分利用培养基中的营养成分和光照条件.插入时应注意方向，不要倒插。茎段、茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养分.0102034、接种注意事项课题1菊花的组织培养组织培养是指在人工培养基上，离体培养植物的器官、组织、细胞和原生质体，并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术。植物的组织培养细胞的分化概念：在个体发育中，相同细胞的后代在形态、结构、生理功能上发生稳定性差异的过程.如：受精卵增殖、生长、分化形成组织、器官、系统.过程：一、基础知识全能性：B.稳定性：细胞分化是稳定的，一般是不可逆转的.已分化的细胞，仍具有发育的潜能.A.持久性：是一种持久性的变化，它发生在生物体的整个生命过程中,在胚胎期达到最大限度.③特点：④结果：⑤原因：基因在特定的时间和空间条件下的选择性表达的结果.形成不同的细胞和组织（2）细胞的全能性①定义：生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性.②原理：生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因.高度特化的动物细胞，从整个细胞来说，全能性受到限制。但它的细胞核仍然保持着全能性，这是因为细胞核内含有该物种遗传性所需要的遗传物质.已分化的植物细胞，仍具有全能性.③实例受精卵生殖细胞体细胞④全能性的比较:原理:1细胞的全能性2相关概念:3细胞离体必要条件：4一定的营养物质、激素和其他外界条件A.外植体：从活植物体上切下进行培养的那部分细胞、组织或器官.5（3）植物组织培养B.脱分化：由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程，又称去分化。01C.再分化：脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程02D.愈伤组织:细胞排列疏松而无规则,是高度液泡化的、成无定形状态的薄壁细胞.03人参的愈伤组织菠萝的愈伤组织01影响植物组织培养的因素02植物材料的选择03烟草和胡萝卜的组织培养较为容易04枸杞愈伤组织的芽诱导比较难05同一植物材料的年龄、保存时间的长短会影响实验结果06菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝离体的植物组织和细胞对营养、环境等条件的要求相对特殊，需配置不同的培养基MS培养基主要成分包括：大量元素:N、P、S、K、Ca、Mg等微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co等有机物、植物激素MS固体培养基成分及比例讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？01答：微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持培养基的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。022，4－二氯苯氧乙酸（2，4－D）、吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA）细胞分裂素类：激动素（KT）、6－苄基嘌呤（6－BA）、玉米素（ZT）123654生长素类：常用的植物激