DB21T 2211.2-2013 养殖贝类种质检测规程 第2部分染色体组型分析.pdfVIP

ICS65.150

B51

DB21

辽宁省地方标准

21/T2211.22013

DB—

养殖贝类种质检测规程

第2部分：染色体组型分析

Thedetectionproceduresofshellfishgermplasm

Part2:karyotypeanalysis

2013-12-12发布2014-01-12实施

辽宁省质量技术监督局发布

DB21/T2211.2—2013

前言

DB21/T****《养殖贝类种质检测规程》分为两个部分：

──第1部分：抽样方法；

──第2部分：染色体组型分析。

本部分为DB21/T****的第2部分。

本标准是按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准由大连海洋大学提出。

本标准由大连市质量技术监督局归口。

本标准起草单位：大连海洋大学。

本标准主要起草人：丁君、常亚青、张静、王轶南。

本标准于2013年**月**日首次发布。

I

DB21/T2211.2—2013

养殖贝类种质检测规程第2部分：染色体组型分析

1范围

本部分规定了养殖贝类染色体组型分析的试剂、仪器和设备、玻片标本制备和组型分析。

2术语和定义

下列术语和定义适用于本部分：

2.1胚胎细胞法

取发育正常的养殖贝类原肠期胚胎或担轮幼虫，加入适量浓度的秋水仙素，使其胚胎细胞被阻抑在

分裂中期而获得养殖贝类染色体中期分裂相的方法。

2.2体细胞法

取鲜活的养殖贝类的鳃组织浸泡在适当浓度的秋水仙素溶液中，使其体细胞被阻抑在分裂中期而获

得养殖贝类染色体中期分裂相的方法。

2.3臂比

染色体的长臂长度与短臂长度之比。

2.4次缢痕

染色体上的缢缩部位。次缢痕的数量、位置和大小是染色体的重要形态特征。

2.5随体

位于染色体末端的圆形或圆柱形的染色体片段,通过次缢痕与染色体主要部分相连。随体是识别染

色体的主要形态特征之一。

3试剂、仪器、设备

3.1试剂

—卡诺固定液：甲醇与冰醋酸按3:1（v/v）的比例混匀，现用现配；

—吉姆萨染液：1.5g吉姆萨粉末溶入50mL甘油中，置于60℃温箱3h后，加入50mL中性甲醇，

棕色瓶中保存。

3.2仪器、设备

—超净工作台；

—天平（精度0.00001g）；

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—显微镜（带显微照像）；

—游标卡尺（精度0.01mm）；

—吸管、离心管、载玻片。

4玻片标本制备

4.1胚胎细胞法

4.1.1取样

吸管吸取发育正常的养殖贝类原肠期胚胎或担轮幼虫50个～100个，置于离心管中，加入50%灭菌

海水配置的0.01%秋