光度计、显色反应及应用.ppt

三、测定条件的选择选择适当的入射波长一般应该选择λmax为入射光波长。如果λmax处有共存组分干扰时，则应考虑选择灵敏度稍低但能避免干扰的入射光波长。为什么需要使用参比溶液？01利用参比溶液来调节仪器的零点，消除比色皿壁及溶剂对入射光的反射和吸收带来的误差。02即测得的的吸光度真正反映待测溶液吸光强度。032.选择合适的参比溶液显色剂及试剂无色，且被测试液中无其它有色离子存在纯溶剂（蒸馏水)例：Mn2+MnO4-试剂、样品均无色H2O01(NH4)2S2O802参比溶液的选择一般遵循以下原则：显色剂无色，被测试液存在其它有色离子不加显色剂的被测试液例：铜试剂显色测定钢中的Cu显色剂、试剂等均有颜色，但试液无色01按测定方法加入（只是不加样02品）03例：邻二氮菲分光光度法测定Fe2+，因04为试剂杂质中也会带来微量铁，所以参05比溶液也加入同样的试剂，就可以抵消06由于试剂中带来微量铁而使结果偏高的07误差。08试液+掩蔽剂（将待测组分掩蔽）+显色剂+试剂（按测定方法加入）可消除共存组分的干扰显色剂、试剂、试液均有颜色仪器测量误差来源：光源不稳定、读数不准确、光电流测量不准等。ΔiΔIΔT光电流测量误差光强测量误差1%~2%但A=-lgT∴同样ΔT，不同A时ΔA不一样推导A=-lgT微分：dA=-d（lgT）=-0.434dlnT为求吸光度相对误差，用A除等式两边：T=-0.434dAA=-（）0.434TAdT=0.434TlgTdTdAA∵=d（εbc）εbcεbdc=εbc=dcc∴dcc=0.434TlgTdT以有限值表示，则上式可写成：浓度测量值的相对误差（Δc/c）不仅与仪器的透光度误差ΔT有关，而且与其透光度读数T的值也有关。是否存在最佳读数范围？何值时误差最小？c=0.434T当读数误差ΔT=1时，则：用不同的透光率T代入上式，所引起的相对误差如表所示TΔcTΔc9520.836.82.739010.7302.8805.6203.2704.0104.3603.356.5502.9212.8c=0.434T最佳读数范围与最佳值若以Δc/c对溶液的透光率T作图。得如下曲线：01T=36.8%，A=0.434时02测量误差最小。03一般T15%~65%A0.2~0.804如何控制最佳吸光度范围？吸光度A=0.80～0.2001控制溶液浓度02选择不同厚度的比色皿032-5光度法的应用示差光度法普通光度法2-3紫外—可见分光光度计目视比色法用眼睛比较溶液颜色的深浅以确定物质浓度的方法称为目视比色法。特点：设备简单、操作简便；无需单色光；准确度不高。分光光度计（一）基本组成光源单色器样品室检测器显示器1.光源在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。可见光区：钨灯作为光源，其辐射波长范围在320～2500nm。紫外区：氢、氘灯。发射185～400nm的连续光谱。2.单色器色散元件：将复合光分解成单色光；棱镜或光栅将光源发射的复合光分解成单色光并可从中选出一任波长单色光的光学系统。3.样品室样品室放置各种类型的吸收池（比色皿）和相应的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池两种。