DB13T 434-2000 甘薯脱毒种苗培育及生产规程.docx

B05DB13

河北省地方标准

DB13/T434-2000

甘薯脱毒种苗培育及生产规程

2000-04-29发布2000-05-01实施

河北省质量技术监督局发布

DB13/T434-2000

前言

本标准由河北省农林科学院提出。

本标准由河北省农林科学院昌黎果树研究所、秦皇岛市甘薯研究开发

中心起草。

本标准主要起草人：章德明、韩继成、郭恩才、陈久铁、杨军。

河北省地方标准

DB13/T434-2000

甘薯脱毒种苗培育及生产规程

1范围

本标准规定了脱毒甘薯核心原种、原原种、原种等三级繁殖材料(其形态包含种薯、薯秧，以下简称种苗)培育及生产技术、工作程序的要求。

本标准适用于甘薯核心原种、原原种、原种脱毒种苗的培育和生产。

2引用标准

下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。

GB7413-87甘薯种苗产地检疫规程。

3定义

本标准采用下列定义

3.1核心原种指经过检测确认，无本规程确定的应脱除病毒的试管苗，在网室隔离条件下外移及系统的种性鉴定后形成的优系种薯。

3.2原原种由核心原种，在网室隔离条件下(包括苗床及露地)形成的种

.苗。

3.3原种由原原种，在空间隔离条件下(包括苗床及露地)形成的种苗。

3.4网室隔离以40目以上尼龙网建成的带有1.5m进深缓冲间的网棚。

3.5空间隔离以育苗床、田间采蔓圃及种薯田的外缘为界，向外垂直距

离500m范围内，无普通甘薯田、蚜传寄主及黄花植物。

4应脱除的病毒

甘薯羽状斑驳病毒SweetpotatofeatheryMottleVirus(SPFMV)

甘薯潜隐病毒SweetpotatoLatentVirus(SPLV)

5核心原种

河北省质量技术监音局2000-04-29批准2000-05-01实施

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DB13/T434-2000

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5.1脱毒

5.1.1外植体选定

在临近田间收获前，取拟脱毒品种健壮单株的蔓尖，材料应具该品种的典型性状(包括地上部及块根)。

5.1.2外植体灭菌

用75%酒精浸搅90s,取出后，再用0.1%升汞(HgCl?)灭菌7min,随即用无菌水冲洗3次以上，放在垫有滤纸的培养皿中，在加皿盖保鲜条件下，将外植体附着的水分吸去。

5.1.3剥离茎尖

在解剖镜下切取0.2mm-0.3mm大小的茎尖(不多于2个叶原基),迅

速置于培养基中。

5.1.4培养条件

温度：24℃±1℃;光照时间：12h-14h;光强：冷光灯2500Lx;培养基：MS,附加成份根据不同品种初代茎尖分化生长的需要，确定BA等生长调节物质相应的加入量；pH5.4-5.8。

5.1.5热处理

当试管苗长到4-5片展开叶时，将其移至38℃±1℃的条件下热处理20d。

5.1.6切取小基

经热处理后的试管苗，再切取一次小茎尖(0.5mm左右)进行培养，培

养条件同5.1.4。

5.1.7建立单株(系)

茎尖发育，获得单株后，编号。

5.2检测

5.2.1NCM-ELISA初检淘汰

当单株(系)的试管苗展开叶达6片以上时进行。按株(系)取样，保留每株的顶芽和带1个基部芽的原株继代。中部材料用NCM-ELISA初检，淘汰呈阳性反应的单株(系)。通过初检的单株(系)继续扩繁。检测方法见

DB13/T434-2000

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附录A(标准的附录)。

5.2.2指示植物检测确认

通过NCM-ELISA的阴性株(系)继续扩繁，在单株(系)有10株以上时，外移7株-8株。待恢复生长、每株形成10片叶以上时，同巴西牵牛嫁接。每单系接5株，以3株成活用于观察有效。检测方法见附录A(标准的附录)。

5.3试管苗生产

5.3.1组培快繁

将最终确认已脱除病毒的保留株(系)进行组培快繁。采用侧芽增殖路线，以避免出现愈伤组织及由其形成的不定芽，即每次继代均切取带1-2个芽的茎段，在试管内微扦插。培养条件同5.1.4。

5.3.2试管繁殖的时期控制

5.3.2.1冀东地区：用于春栽时(5月上旬),应于3月1日后进行试管内锻炼(在自然光、温条件下进行，外移前2d-3d逐渐打开瓶盖),为期1周，4月1日前移栽于有隔离网的温室。经扦插扩繁后，于5月上旬栽植于露地网室