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番茄内生细菌Eb-28对番茄灰霉病菌抑制作用研究

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番茄内生细菌Eb-28对番茄灰霉病菌抑制作用研究

摘要：番茄灰霉病是番茄生产中的重要病害，严重影响番茄的产量和品质。本研究以番茄内生细菌Eb-28为研究对象，通过室内盆栽试验和田间试验，研究了Eb-28对番茄灰霉病菌的抑制作用。结果表明，Eb-28对番茄灰霉病菌具有显著的抑制作用，其抑制效果与化学农药相当，且对番茄生长安全无副作用。本研究为番茄灰霉病的生物防治提供了新的思路和方法。

番茄灰霉病是由真菌引起的病害，严重威胁番茄的产量和品质。目前，番茄灰霉病的防治主要依靠化学农药，但长期使用化学农药会导致病原菌产生抗药性，同时还会对环境和人体健康造成危害。因此，寻求安全、高效的生物防治方法成为番茄灰霉病防治的重要研究方向。近年来，内生细菌在植物病害的生物防治中显示出良好的应用前景。本研究以番茄内生细菌Eb-28为研究对象，通过室内盆栽试验和田间试验，研究了Eb-28对番茄灰霉病菌的抑制作用，旨在为番茄灰霉病的生物防治提供新的思路和方法。

一、1.材料与方法

1.1试验材料

(1)本研究采用番茄品种为“番茄王”，种子来源于我国某知名种子公司，该品种具有果实大、色泽鲜艳、口感好等特点。试验前，将种子进行消毒处理，以去除表面的病原菌和杂质。具体操作为：将种子浸泡在1%的氯化钠溶液中30分钟，然后用清水冲洗干净，置于恒温培养箱中催芽，待种子露白后进行播种。

(2)试验用番茄内生细菌Eb-28分离自我国某番茄种植基地，经形态学鉴定和16SrRNA基因序列分析，鉴定为芽孢杆菌属。试验前，将Eb-28接种于牛肉膏蛋白胨培养基中，在37℃、200r/min的条件下培养24小时，制成浓度为1×10^8CFU/mL的Eb-28菌悬液。在试验过程中，Eb-28菌悬液需在无菌条件下保存，避免污染。

(3)试验用番茄灰霉病菌分离自番茄灰霉病病株，经形态学鉴定和分子鉴定，确定为灰葡萄孢菌。试验前，将灰葡萄孢菌接种于马铃薯葡萄糖琼脂培养基上，在25℃、黑暗条件下培养7天，制成浓度为1×10^6CFU/mL的灰葡萄孢菌悬液。试验过程中，灰葡萄孢菌悬液需在无菌条件下保存，避免污染。此外，试验还使用了番茄幼苗、塑料盆、土壤、农药等材料。所有试验材料均符合试验要求，确保试验结果的准确性。

1.2试验方法

(1)室内盆栽试验分为对照组和试验组，每组设置3个重复。对照组不施加任何处理，仅用清水喷洒；试验组分别喷施不同浓度的Eb-28菌悬液，浓度分别为1×10^6CFU/mL、1×10^7CFU/mL、1×10^8CFU/mL。喷施后，观察番茄植株的生长状况和灰霉病的发生情况，记录数据。

(2)田间试验选取我国某番茄种植基地，面积为1000平方米。试验设对照组和试验组，每组设置3个重复。对照组采用常规化学防治方法，试验组采用Eb-28菌悬液进行喷施，喷施方法同室内盆栽试验。试验期间，定期观察番茄植株的生长状况和灰霉病的发生情况，记录数据。

(3)数据分析采用SPSS22.0软件进行统计分析，主要包括方差分析、相关性分析和回归分析等。通过比较不同处理组间的差异，评估Eb-28对番茄灰霉病菌的抑制作用。同时，分析Eb-28对番茄生长的影响，为番茄灰霉病的生物防治提供理论依据。

1.3数据分析

(1)数据分析首先对室内盆栽试验和田间试验中的番茄灰霉病发病率进行了统计分析。结果显示，对照组的番茄灰霉病发病率分别为15%、20%和25%，而试验组在不同浓度Eb-28菌悬液处理下的发病率分别为5%、8%和10%。这表明Eb-28对番茄灰霉病菌具有显著的抑制作用，且随着Eb-28浓度的增加，抑制作用逐渐增强。

(2)进一步分析Eb-28对番茄植株生长的影响，通过测量番茄植株的株高、叶片数和果实重量等指标。结果显示，与对照组相比，试验组番茄植株的平均株高提高了20%，叶片数增加了15%，果实重量增加了12%。这表明Eb-28不仅能有效抑制番茄灰霉病的发生，还能促进番茄植株的生长。

(3)为了验证Eb-28对番茄灰霉病菌的抑制作用是否具有持久性，对Eb-28处理后的番茄植株进行了为期30天的跟踪观察。结果显示，Eb-28处理后，番茄植株的灰霉病发病率在30天内均保持在较低水平，说明Eb-28对番茄灰霉病菌的抑制作用具有较长的持久性。此外，通过相关性分析和回归分析，发现Eb-28的抑制效果与喷施浓度呈正相关，即喷施浓度越高，抑制作用越强。

二、2.室内盆栽试验

2.1试验设计

(1)试验设计采用随机区组设计，将番茄幼苗分为对