疫苗基本知识.ppt

载体：腺病毒、牛痘病毒、金丝雀痘病毒、伤寒沙门菌减毒株、卡介苗、乳杆菌等。

病原体：乙型肝炎病毒、狂犬病病毒、痢疾杆菌等。五、活载体疫苗第30页，共67页，星期日，2025年，2月5日一、概述

二、灭活疫苗

三、减毒活疫苗

四、亚单位疫苗

五、活载体疫苗

六、核酸疫苗七、植物疫苗八、治疗性疫苗微生物疫苗第31页，共67页，星期日，2025年，2月5日1990年，Wolff等首次发现，给小鼠肌肉注射裸露质粒DNA后，质粒携带的基因可被肌细胞摄取并在其中表达，还可诱生特异性免疫应答。四、核酸疫苗第32页，共67页，星期日，2025年，2月5日核酸疫苗（nucleotidevaccine）：又称DNA疫苗（DNAvaccine），是将一种或多种目的抗原的编码基因克隆到真核质粒表达载体上；再将重组质粒直接注入到体内，在宿主细胞内表达目的蛋白，诱发特异性免疫应答。四、核酸疫苗第33页，共67页，星期日，2025年，2月5日目前进入临床试验的核酸疫苗有HIVDNA疫苗和疟疾DNA疫苗。四、核酸疫苗第34页，共67页，星期日，2025年，2月5日由于核酸疫苗具有构建容易、生产方便、表达稳定及可诱发全面的免疫应答等特点，在抗感染、抗肿瘤免疫及疾病的预防等方面具有广阔的应用前景，被誉为疫苗的“第三次革命”。四、核酸疫苗第35页，共67页，星期日，2025年，2月5日局部注射的核酸（重组质粒DNA）被周围的细胞（如黏膜上皮细胞、抗原提呈细胞）摄取后，进入核内进行转录，并在胞质中翻译成目的蛋白。1、免疫机制四、核酸疫苗第36页，共67页，星期日，2025年，2月5日目的蛋白被蛋白酶复合体降解成含有表位的抗原肽，可作为：

●“内源性抗原”：与MHCⅠ类分子结合，诱发CTL介导的细胞免疫应答。

●“外源性抗原”：与MHCⅡ类分子结合，诱发偏向Th1型免疫应答。四、核酸疫苗第37页，共67页，星期日，2025年，2月5日目的蛋白亦可通过细胞分泌或细胞破裂的方式进入组织间，以天然折叠形式激活B淋巴细胞而产生抗体。四、核酸疫苗第38页，共67页，星期日，2025年，2月5日DNA疫苗接种后，体内仅表达pg～ng水平的外源蛋白，但能诱发强而持久的细胞免疫和体液免疫应答。

如何解释这一现象呢？四、核酸疫苗第39页，共67页，星期日，2025年，2月5日目的基因（含载体质粒）含有CpG基序的回文序列，能激活较强的CTL效应，并能激活巨噬细胞与NK细胞，因此，CpG回文序列被称为免疫刺激DNA序列。CpG基序与IL-2、TNF-β、IFN-γ的基因结构相似而产生协同作用。四、核酸疫苗第40页，共67页，星期日，2025年，2月5日2、构建与免疫①目的基因的选择：侧重于免疫原性，即所表达的目的蛋白刺激机体免疫应答的能力。目的蛋白中是否具有受MHC分子限制的T细胞抗原表位，是保证核酸免疫有效的先决条件。四、核酸疫苗第41页，共67页，星期日，2025年，2月5日核酸疫苗所选择的目的基因应尽量避免有害基因成分，特别是病毒或肿瘤的核酸免疫。四、核酸疫苗第42页，共67页，星期日，2025年，2月5日②载体的选择：构建DNA疫苗的质粒通常是非复制型的真核表达质粒，能高水平地表达目的基因。四、核酸疫苗第43页，共67页，星期日，2025年，2月5日重组质粒可分为两个部分：●转录部分：由启动子、插入的目的抗原cDNA和polyA终止子组成，指导目的蛋白在体内表达，诱发特异性免疫应答。●佐剂部分：CpG基序。四、核酸疫苗第44页，共67页，星期日，2025年，2月5日③启动子的选择：质粒在宿主细胞内表达外源性蛋白的水平与调控DNA表达的启动子关系密切。表达水平的不同又直接影响免疫应答的强度和持续性。四、核酸疫苗第45页，共67页，星期日，2025年，2月5日④DNA疫苗的优化

●联合构建：在载体质粒中插入2个或2个以上目的抗原基因，既能激活CD8＋T细胞产生特异性CTL，又能激活CD4＋Th2细胞产生体液免疫。

●协同构建：将目的基因与某种细胞因子的基因构建成嵌合基因，以促进目的基因的免疫效果。四、核酸疫苗第46页，共67页，星期日