无菌部位标本的细菌检验岳阳王华洪讲解.pptx

无菌部位标本的细菌检验;一、血液及骨髓标本的细菌学检验

（一）标本的采集

1.皮肤消毒

?严格执行三步法

2.采血部位：

?肘静脉

?肘动脉或股动脉采血

?婴幼儿采颈静脉血

;3.采集方法

?严格无菌操作

4.采血量

?比例：1:10

?成人8～10ml/瓶

?儿童1～5ml/瓶

?婴儿1～2ml/瓶

?骨髓1～2ml/瓶

;疾病;（二）微生物学检验

1.常见病原菌;2.检验程序;培养基性状改变;阳性培养瓶;（2）特殊细菌培养与鉴定

?脑膜炎奈瑟菌;（2）特殊细菌培养与鉴定

?草绿色链球菌;血液

骨髓;标本;4.结果报告

采取分级和限时报告制度

?初报告：将镜检结果电话通知主管医生

?预报告：6～8小时内报告直接药物敏感结果

?最终报告：报告细菌种属、药敏试验、结果评价及建议

?阴性报告;（三）临床意义

?排除杂菌污染，从血液和骨髓标本中检出任何细菌都具有临床意义

?葡萄球菌是血液感染最常见的细菌

?草绿色链球菌是亚急性心内膜炎的主要致病菌

?尿路、胆道、胃肠道炎症粘膜损伤引起的败血症以大肠埃希菌多见

?产单核李斯特菌主要引起新生儿败血症;二、脑脊液标本的细菌学检验

（一）标本的采集

1.采集部位

?腰椎穿刺法

2.采集量

?3～5ml

3.标本的运送和保存

?15分钟内送检，最迟不能超过1小时。疑似苛养菌感染时，应保温送检

;（二）微生物学检验

1.常见病原菌

;2.检验程序;肺炎链球菌;

?抗酸染色?墨汁负染色

;（2）分离培养与鉴定

?普通细菌

标本→血琼脂平板和巧克力平板（35℃，CO2环境）→可疑菌落→形态、生化试验及血清学试验、药敏试验

?结核分枝杆菌

标本→罗-琴培养基或米氏7H-10培养基→35℃温箱孵育→可疑菌落→鉴定;?真菌

标本→血平板或沙保弱培养基→25℃及37℃孵育→可疑菌落→形态、镜检及生化反应等鉴定。

?厌氧菌

标本→血平板、厌氧血琼脂平板和硫乙醇酸钠肉汤→35℃需氧、厌氧培养→可疑菌落→染色镜检及生化鉴定、药敏试验;4.结果报告

?初报告：报告标本直接涂片结果

?预报告：报告标本直接药敏试验结果

?最终报告：报告细菌种属、药敏试验、结果评价及建议

?阴性报告;（三）临床意义

?脑膜炎奈瑟菌引起细菌性脑膜炎

?结核分枝杆菌引起的结核性脑膜炎

?真菌性脑膜炎最常见的病原体是新型隐球菌，白假丝酵母菌、球孢子菌好发于免疫功能低下和恶性疾病患者;开放性脓肿;（二）微生物学检验

1.常见病原菌;2.检验程序;3.检验方法

（1）涂片检查

?普通细菌检查：根据形态和染色特点，报告

?放线菌检查：查找“硫磺样颗粒”，挑取“硫磺样颗粒”制片。用低倍镜及高倍镜检查并报告

?厌氧芽孢梭菌检查：描述是否有芽胞、芽胞位置及形状;（2）分离培养与鉴定

?普通细菌培养标本→血平板、中国蓝/麦康凯平板→35℃、需氧培养→典型菌落→染色镜检、生化反应等鉴定

?产气荚膜梭菌培养标本→血琼脂平板、卵黄琼脂平板、庖肉培养基→35℃、厌氧环境→可疑菌落→染色镜检、生物学性状鉴定;4.结果报告

?初级报告：报告“找到革兰×性球（杆）菌，呈××排列，形似××细菌”

?最终报告：报告“检出××细菌”、药敏试验、结果评价及建议

?阴性报告：报告“经48小时培养无细菌生长”

特殊菌感染，应延长培养时间;（三）临床意义

?葡萄球菌和链球菌是引起外伤性创伤感染最常见的细菌

?深部创伤和复杂性骨折，可发生厌氧菌感染

?烧伤创面感染最常见细菌是铜绿假单胞菌

?放线菌感染可发生在拨牙、口腔黏膜损伤时