《甘蓝类蔬菜黑斑病菌分子检测技术规程》.pdfVIP

ICS65.020.20

CCSB15

32

江苏省地方标准

DB32/TXXXX—2025

甘蓝类蔬菜黑斑病菌分子检测技术规程

TechnicalregulationformoleculardetectionofAlternariabrassicicola

oncolevegetables

（报批稿）

2025-XX-XX发布2025-XX-XX实施

江苏省市场监督管理局  发布

DB32/TXXXX—2025

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

本文件的某些内容可能涉及专利。本文件发布机构不应承担识别这些专利的责任。

本文件由江苏省园艺标准化技术委员会提出、归口并组织实施。

本文件起草单位：江苏省农业科学院、江苏省农业技术推广总站、江苏益禾农业科技有限公司。

本文件主要起草人：余方伟、曾晓萍、李建斌、夏冬健、王神云、张伟、杨伟国、周晗昕、黄鹂、

王桂楼。

I

DB32/TXXXX—2025

甘蓝类蔬菜黑斑病菌分子检测技术规程

1范围

本文件规定了甘蓝类蔬菜黑斑病菌分子检测的原理、试剂和材料、仪器设备、试验步骤和结果判定。

本文件适用于甘蓝类蔬菜叶片、花茎、角果等部位黑斑病菌的分子检测。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

SN/T2965植物病原真菌分子生物学检测规范

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

甘蓝类蔬菜黑斑病Blackspotofcolevegetables

由芸薹生链格孢（Alternariabrassicicola）侵染引起的病害，该菌属半知菌亚门，丝孢目，暗

色菌科，链格孢属。甘蓝类蔬菜黑斑病症状及病原菌形态特征见附录A。

4缩略语

下列缩略语适用于本文件。

DNA脱氧核糖核酸（Deoxyribonucleicacid）

RPA重组酶聚合酶扩增（Recombinasepolymeraseamplification）

Tris三羟甲基氨基甲烷（Tris（hydroxymethyl）aminomethane）

TAE三羟甲基氨基甲烷/乙酸/乙二胺四乙酸（Tris/aceticacid/ethylenediaminetetraacetic

acid）

PCR聚合酶链式反应（Polymerasechainreaction）

5原理

重组酶聚合酶扩增是一种快速分子检测技术，主要依靠重组酶、单链结合蛋白和链置换DNA聚合酶，

在特定恒温条件下实现对甘蓝类蔬菜黑斑病菌靶标序列的高效扩增。RPA反应开始时，重组酶在三磷酸

腺苷的参与下结合引物，形成重组酶-引物复合体。这些复合体能够扫描与引物序列互补的目标双链DNA，

然后侵入5端位点，随后单链结合蛋白与