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水稻转录因子OsERF104的克隆和功能研究.docx

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水稻转录因子OsERF104的克隆和功能研究

水稻转录因子OsERF104的克隆和功能研究（1）．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

一、内容简述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

二、水稻转录因子OsERF104的概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3

2.1OsERF104的基本信息．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4

2.2OsERF104的功能预测．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5

三、OsERF104的克隆与表达载体构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6

3.1PCR扩增OsERF104基因片段．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7

3.2DNA序列分析与验证．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8

3.3植物表达载体构建．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9

四、OsERF104在水稻中的表达情况．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10

4.1转基因植株的筛选．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11

4.2表达产物的检测与分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12

五、OsERF104对水稻生长发育的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13

5.1生长发育阶段的选择．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14

5.2对光周期反应的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15

5.3对抗逆性的影响．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16

六、OsERF104调控机制的研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17

6.1酪氨酸激酶信号通路的作用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18

6.2ORE元件及其调控网络的发现．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19

七、OsERF104的功能验证实验．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20

7.1基因敲除及过表达实验．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21

7.2其他相关分子生物学技术的应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22

八、讨论与结论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23

8.1主要研究成果总结．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24

8.2研究局限性分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25

8.3未来研究方向展望．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26

水稻转录因子OsERF104的克隆和功能研究（2）．．．．．．．．．．．．．．．．．28

一、内容简述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

1.1水稻的重要性．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

1.2OsERF转录因子家族的研究现状．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．28

1.3研究OsERF104的意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30

二、实验材料与方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30

2.1实验材料．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．31

2.1.1水稻品种及组织选择．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32

2.1.2试剂与工具．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．33

2.2实验方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．34

2.2.1OsERF104基因的克隆．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35

2.2.2序列分析．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．

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