DB32T 2902-2016 大花蕙兰组织培养技术规程.pdfVIP

ICS65.020.20

B05

备案号：49031-2016DB32

江苏省地方标准

DB32/T2902-2016

大花蕙兰组织培养技术规程

TechnicalregulationforrapidpropagationinvivoofCymbidiumhybrid

2016-03-10发布2016-04-10实施

江苏省质量技术监督局发布

DB32/T2902-2016

前言

本标准按照GB/T1.1-2009《标准化工作导则第一部分：标准的结构和编写规则》的规定编制。

本标准提出单位：由江苏省中国科学院植物研究所。

本标准起草单位：江苏省中国科学院植物研究所、常州祝庄园艺有限公司。

本标准主要起草人：顾永华、郑玉红、李丕睿、李晓敏、韩福贵、李和平、杨军、高福洪。

I

DB32/T2902-2016

大花蕙兰组织培养技术规程

1范围

本标准规定了大花蕙兰组织培养技术要求。

本标准适用于大花蕙兰的组培快繁。

2规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版

本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

3母株选择

选择具该品种典型性状、生长健壮且无病虫害的母株。

4外植体

4.1选择

剪取长度5cm～8cm的幼芽。

4.2消毒

在洗涤剂溶液中振荡洗涤20min后，在无菌条件下切去芽的上半段，剥去最外层的（1～2）枚叶，

在95％酒精中浸泡30s，再剥去（2～3）片叶，露出顶芽和侧芽。用0.2％的升汞浸泡15min～20min

后，无菌水冲洗（6～8）次，吸水纸吸干表面水分。在1％次氯酸钠中浸泡1min后取出，无菌水冲洗

约10min。

5原球茎诱导

诱导培养基：MS+NAA0.2mg/L+6-BA2.0mg/L+活性炭0.5g/L，pH5.8。将顶芽和侧芽在75％酒精

中浸泡15s，无菌水冲洗数次，切成小块，放入诱导培养基。培养温度为（25±1）℃,光照强度为1500

lx~2000lx，光照时间为12h～15h。待幼苗长至3cm～4cm时，切除顶部苗，将原球茎纵切成3mm~

4mm厚的薄片，将薄片切面向下放入诱导培养基中培养。

6继代增殖

继代培养基：1/2MS+NAA0.1mg/L+6-BA1.0mg/L+活性碳0.5g/L，pH5.8。将原球茎去芽后接种于

继代培养基。培养温度为（25±1）℃,光照强度为1500lx~3000lx，光照时间为12h～15h。40d～50d

后继代1次。

7生根培养

1

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生根培养基：1/2MS+NAA1.0mg/L，GA1.0mg/L+活性碳1.0g/L，pH5.6。当继代苗长至2cm～4cm3

高时切下接种到生根培养基，培养温度为25℃,光照强度为3000lx~5000lx，光照时间为12h～13h。

8炼苗

当生根苗的