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胆碱瘤胃降解率测定方法

A.1试验动物和材料

A.1.1试验动物

安装有永久性瘤胃瘘管的成年牛4头（或以上），瘘管内径应大于100mm。

A.1.2尼龙袋

A.1.2.1选用350目的尼龙布，制成长×宽为8cm×12cm的尼龙袋，用细涤纶线双线缝合尼龙袋，针

孔用在瘤胃内不易溶解的胶粘剂粘合，袋底部两角呈钝圆形，散边用烙铁烫平或用酒精灯烤焦。

A.1.2.2应对尼龙袋进行编号，第一次使用前放入瘤胃内72h，取出、洗净、50℃烘干后备用。

A.1.3半软塑料管

A.1.3.1半软塑料管的直径应介于0.5cm~0.8cm之间，长度为40cm~50cm。

A.1.3.2在塑料管的一端距顶端1cm~2cm处向远端划出长2cm~3cm的夹缝，用于固定尼龙袋，在塑

料管的另一端距顶端1cm~2cm处打孔，孔直径约0.2cm~0.3cm，用于系尼龙线，将塑料管固定于瘤

胃瘘管盖上。

A.2仪器设备

A.2.1分析天平：精度为0.0001g

A.2.2鼓风干燥箱

A.2.3托盘

A.2.4粉碎机

A.3操作步骤

A.3.1称样和装袋

A.3.1.1将待测样品置于50℃鼓风干燥箱内烘干至恒重。

A.3.1.2将尼龙袋置于50℃鼓风干燥箱内烘干至恒重。

A.3.1.3用分析天平称取尼龙袋质量，然后称取6g左右经50℃恒重的待测样品放入尼龙袋底部。尼龙

袋和待测样品质量均精确至0.0001g。

A.3.2固定尼龙袋

分别将两个装有待测样品的平行样尼龙袋口交叉于一根半软塑料管的夹缝内，用像皮筋缠绕固定。

A.3.3投放尼龙袋

早晨饲喂前1h，打开试验动物的瘤胃瘘管盖，将尼龙袋通过瘤胃瘘管放入瘤胃腹囊中，用塑料管

上的尼龙线将塑料管固定于瘘管口部。

A.3.4待测样品在瘤胃内培养时间

待测样品在瘤胃内的培养时间为：8h、24h，每头牛每个时间点设置2个重复。

A.3.5取出尼龙袋

每个培养时间点（8h、24h）从每头试验动物瘤胃中各取出2个尼龙袋，直至所有尼龙袋全部取出

为止。

A.3.6冲洗尼龙袋

取出的尼龙袋应尽快用自来水冲洗，直至水清为止。在冲洗过程中不应用手挤压袋内样品。

A.3.7样品校正

称取6g左右经50℃恒重的2个待测样品放入尼龙袋底部，作为空白对照，不放入瘤胃内，直接

用自来水冲洗，直至水清为止。在冲洗过程中不应用手挤压袋内样品。

A.3.8烘干尼龙袋

将冲洗过的尼龙袋置于50℃鼓风干燥箱内烘干至恒重。用分析天平称重，精确至0.0001g。

A.3.9空白袋残余物和各培养时间点残余物的氯化胆碱含量测定

分别将各尼龙袋中的残余物完全转移出来，将样品粉碎完全，然后按HG/T2941规定的方法进行

检测。

A.4结果计算

A.4.1样品逃逸率

样品逃逸率按式（A.1）计算：

푚−푚

A＝12×100%…………………（A.1）

푚1

式中：

A———样品逃逸率，单位为百分数（%）；

푚———空白试验装袋样品干物质质量，单位为克（g）；

1

푚2———空白试验袋中残余物质量，单位为克（g）。

A.4.2校正装袋样品质量

校正装袋样品质量按式（A.2）计算：

푚＝푚×（1-43A）………………（A.2）

式中：

푚———校正装袋样品质量，单位为克（g）；

4

푚———实际装袋样品质量，单位为克（g）。

3

A.4.3氯化胆碱瘤胃降解率

氯化胆碱瘤胃降解率按式（A.3）计算：

푚×퐶−(푚×퐷)

B＝45×100%………（A.3）

푚4×퐶

式中：

B———氯化胆碱瘤胃降解率，单位为百分数（%）；