高中生物实验基础知识.docVIP

高中生物实验根底知识

实验一观察DNA、RNA在细胞中的分布

1、原理、步骤、结论

2、实验考前须知

(1)选材：口腔上皮细胞、无色的洋葱表皮细胞，不能用紫色洋葱表皮细胞或叶肉细胞，防止颜色的干扰。

(2)缓水流冲洗目的：防止玻片上的细胞被冲走。(3)几种试剂在实验中的作用

①0.9%NaCl溶液(生理盐水)：保持口腔上皮细胞正常形态。

②8%盐酸：a.改变细胞膜等的通透性；b.使染色体中DNA与蛋白质分开。

③蒸馏水：a.配制染色剂；b.冲洗载玻片。

④甲基绿吡罗红染液：混合使用且现配现用。

(4)DNA和RNA在细胞核和细胞质中都有分布，只是量的多少不同。故结论中强调“主要”而不能说“只”存在于细胞核或细胞质中。

实验二检测生物组织中复原糖、脂肪和蛋白质

1、实验原理及步骤

2、实验考前须知

(1)复原糖鉴定实验材料要求

①浅色：不能用绿色叶片、西瓜、血液等材料，防止颜色的干扰。

②复原糖含量高：不能用马铃薯(含淀粉)、甘蔗、甜菜(含蔗糖)。

(2)唯一需要加热—复原糖鉴定，且必需水浴加热，不能用酒精灯直接加热。假设不加热那么无砖红色沉淀出现。

(3)非复原糖(如蔗糖)＋斐林试剂〔水浴加热〕，现象不是无色而是浅蓝色[Cu(OH)2的颜色]。

(4)唯一需要显微镜——脂肪鉴定，实验用50%酒精的作用——洗掉浮色。

(5)记准混合后参加——斐林试剂，且现配现用；分别参加——双缩脲试剂(先加A液，后加B液，且B液不能过量)。两者成分相同，但CuSO4的浓度不同，所以不能混用。

(6)假设用大豆做材料，必须提前浸泡；假设用蛋清作材料，必须稀释，防止其粘在试管壁上不易涮洗；且该实验应预留局部组织样液做比照。

(7)易写错别字提示：“斐林试剂”中的“斐”不可错写成“非”；双缩脲试剂中“脲”不可错写成“尿”。

实验三用显微镜观察多种多样的细胞

1、显微镜的使用

2、显微镜使用的一般程序：

①、取镜和安放：右手握住镜臂，左手托住镜座；轻拿轻放，并略偏左；装好目镜和物镜。

②、对光：扭动转换器，使镜头〔低倍镜〕、镜筒和通光孔成一直线；根据光线强弱，调节反光镜和遮光器〔光圈〕

③、放置标本：玻片标本放置要正对通光孔的中央，用压片夹固定

④、调焦观察：转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓下降，直到物镜接近玻片标本为止〔此时眼睛应当看到物镜镜头与标本之间，以免物镜与标本相撞〕；左眼看目镜内，同时反向缓缓转动粗准焦螺旋，使镜筒上升，直到看到物象为止，在稍稍转动细准焦螺旋，使看到的物象更清晰；移动装片，在低倍镜下使需要放大观察的局部移动到视野中央；转动转换器，换成高倍物镜；缓缓调节细准焦螺旋，使物象清晰；调节光圈，使视野亮度适宜。

⑤、善后整理：将显微镜外表擦拭干净；转动转换器，把两物镜偏到旁边，下调镜筒至最低，送回镜箱。

3、显微镜使用的考前须知：

先低后：先低倍镜后高倍镜；先放低镜筒，再向上调节〔换高倍镜后只能用细准焦螺旋！〕

成像规律：上下、左右颠倒〔如何移动玻片〕变化规律：图像变大、数量减少、视野变暗

放大倍数：物x目指的是长度上的放大倍数

高放大倍数的表现：目镜越短，物镜越长，物镜距离玻片越近〔目短物长距离近〕

污点位置判断：分别转动镜头、移动装片,看污点是否随之而动

4、高倍镜与低倍镜的比拟

物像大小

看到细胞数目

视野亮度

物镜与玻片的距离

视野范围

高倍镜

大

少

暗

近

小

低倍镜

小

多

亮

远

大

实验四观察线粒体和叶绿体

1、实验原理

①叶绿体呈绿色的椭球形或球形，不需染色，制片后直接观察。

②线粒体呈无色棒状、圆球状等，用健那绿染成蓝绿色后制片观察。

2、实验步骤

①观察叶绿体：制作藓类叶片的临时装片→先低倍镜后高倍镜观察叶绿体

②观察线粒体：制作人的口腔上皮细胞临时装片〔健那绿染液染色〕→先低倍镜后高倍镜观察观察线粒体

3、注意问题

①实验过程中的临时装片要始终保持有水状态。

②要漱净口腔，防止杂质对观察物像的干扰。

③用菠菜叶带叶肉的下表皮的原因：靠近下表皮的叶为海绵组织，叶绿体大而排列疏松，便于观察；带叶肉是因为表皮细胞不含叶绿体。

④叶绿体在弱光下以椭球形的正面朝向光源，便于接受较多的光照；在强光下那么以侧面朝向光源以防止被灼伤。

实验五通过模拟实验探究膜的透性

1．渗透系统的组成及条件

(1)半透膜可以是生物性的选择透过性膜，如细胞膜，也可以是物理性的过滤膜，如玻璃纸。

(2)半透膜两侧的溶液具有浓度差。浓度差的实质是单位体积溶液中溶质分子数的差，即物质的量浓度之差，即摩尔浓度而不是质量浓度。

2、考前须知

①假设溶质分子能通过半透膜，那么先是浓度高的一侧液面升高，随后另一侧液面上升，最后到达渗透平衡。

②图中，在到达渗透平衡后，只要存在液面差Δh，那么S1溶液的浓度仍大于S2溶液的浓度。

③假设S