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2025年HPLC使用 _原创精品文档.pdfVIP

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志不强者智不达,言不信者行不果。——墨翟

WatersHPLC系统SOPWaters高效液相色谱系统操作规程

600E-2025

1.目的

规范Waters高效液相色谱系统的使用和维护。

2.范围

本规程适用于Waters高效液相色谱系统的使用和维护。

3.职责

质检室仪器分析员负责Waters高效液相色谱系统的日常使用和维护。

4.系统组成

本系统由Waters600E多溶剂输送系统(有梯度控制器的高压输液

泵)、Waters在线脱气机、Rheodyne7725i手动进样阀、Waters2487

双通道紫外检测器、Millennium32色谱工作站/电脑等组成,另外还

包括打印机、UPS和通风柜等辅助设备。

5.程序

5.1.准备

5.1.1.使用前应根据待检样品的检验方法准备所需的流动相(应足

够;流动相必须用0.45μm滤膜过滤)、样品和标准溶液(也可在平

衡系统时配制),更换合适的色谱柱(柱进出口位置应与流动相流向

一致)和定量环。

5.1.2.通电前应检查仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否

连接正常。

5.2.开机和泵操作

5.2.1.开机

5.2.1.1.接通UPS的电源,依次打开断电保护器、脱气机、600E泵、

2487检测器,待检测器自检结束显示测量状态时,打开打印机、电

脑显示器、主机。

5.2.1.2.打开Millennium32软件,按「Login...」,输入用户名和密码,

按「OK」注册进入系统主界面。在Project档内选择所需的项目,右

击『RunSamples』图标,选择色谱系统“600_2487”后打开QuickSet

窗口。

5.2.2.更换溶剂

5.2.2.1.打开600E泵后,转动进口集合管阀手柄(以下简称手柄)至

RUN位置;

5.2.2.2.将一塑料烧杯放在参照阀出口管下以收集分流的溶剂,向右

打开参照阀(断开柱和进样器);

5.2.2.3.按[Direct]键使其显示直接控制屏幕,设流速为1ml/min(梯

度配比阀在0ml/min时不工作);

5.2.2.4.选择欲使用的某一溶剂通道,设其比例为100%,其它为0%;

5.2.2.5.将输液管从原有溶剂瓶中取出,放入一干净的空瓶中;

5.2.2.6.逆时钟转动手柄至DRAW位置,用启动注射器从进口集合管

阀的接口抽出约2ml溶剂;

5.2.2.7.再将输液管放入新溶剂瓶内,继续抽吸直到新溶剂出来并无

气泡为止;

5.2.2.8.转动手柄至RUN位置,将启动注射器取下并排掉筒内的溶

剂。

5.2.2.9.重复5.2.2.4.~5.2.2.8.直至所有即将使用的溶剂更换完毕。

5.2.3.排气泡

去留无意,闲看庭前花开花落;宠辱不惊,漫随天外云卷云舒。——《幽窗小记》

5.2.3.1.打开参照阀,换流动相为100%超纯水,设流速为10ml/min

(注意:确认参照阀是打开的,否则可能损坏安装好的柱);

5.2.3.2.转动进口集合管阀手柄至DRAW位置,用启动注射器抽出约

10ml水;

5.2.3.3.顺时钟转动手柄至INJ位置,缓慢用力使水通过泵头从参照

阀出口管排出(注意不要将气泡注入泵中);

5.2.3.4.按[Stopflo

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