液相色谱质谱联用仪的原理及应用.ppt

*MB： 是在LC柱后增加一个传送带，柱后流出物滴落 在传送带上，经红外线加热除去大部分溶剂后进 入真空室，传送带依据流动相的组成调整移动速 度。优点：基于溶剂和样品的沸点差别进行分离，可被用于 大部分有机物的质谱分析。缺点：不适于分析高沸点、难挥发的化合物； 离子化效率低； 灵敏度低； 移动带上残存的难挥发物质易造成记忆效应而干 扰分析。移动带技术MB第31页，共72页，星期日，2025年，2月5日*TS： 喷雾探针取代直接进样杆，流动相经过喷雾针 时被加热到低于完全蒸发点5-10℃，体积膨胀 后以超声速喷出探针形成雾状混合物。优点：可适应较大流速和含水较多的液相流动相。缺点：分子量局限于200-1000u的化合物； 对热稳定性较差的化合物有比较明显的分解作 用。热喷雾接口TS第32页，共72页，星期日，2025年，2月5日*FB： 又称动量分离器。流动相及样品被喷雾成气 溶胶，脱去溶剂后在动量分离器内产生动量 分离，而后经一根加热的转移管进入质谱。优点：离子化由质谱的EI或CI方式进行，可以获得 经典的质谱图。缺点：由于离子化手段仍为电子轰击，不是软离子 化方式，因此不适于分析热不稳定化合物； 主要用于分析非极性或中等极性的、分子量 小于1000u的化合物。粒子束接口FB第33页，共72页，星期日，2025年，2月5日*FAB：快原子轰击电离源优点：是“冷”离子源，适于分析热不稳定、难气化 的化合物，尤其是对肽类和蛋白质分析的有 效性在电喷雾接口出现前是其它接口无法相 比的。缺点：混合物样品中共存物质干扰抑制样品分子的 离子化，造成灵敏度下降； 只能在低流量下工作，严重限制了液相柱的 分离效果。快原子轰击FAB第34页，共72页，星期日，2025年，2月5日*基质辅助激光解析MALDIMALDI：基质辅助激光解析电离源优点：特别适合与飞行时间质谱联用，可测分子量 范围高达上百万u，并且具有很高的灵敏 度。缺点：与FAB相同，混合物样品中共存物质的干扰 也很明显，造成质谱信号很弱或根本没有， 灵敏度下降。第35页，共72页，星期日，2025年，2月5日*电喷雾电离ESIESI：电喷雾电离源特点：应用范围广泛；离子化效率高，对蛋白质而言接近100%；多种离子化模式供选择：ESI（+）、ESI（-）；可产生多电荷离子，适于测量大分子量的蛋白质；属于“软”离子化模式，可分析热不稳定化合物。第36页，共72页，星期日，2025年，2月5日*大气压化学电离APCIAPCI：大气压化学电离源特点：属于“软”电离方式，适于分析质量数小于2000u的弱极性小分子化合物；多种离子化模式供选择：APCI（+）、APCI（-）；只产生单电荷离子，主要是准分子离子，很少有碎片离子。第37页，共72页，星期日，2025年，2月5日*实验室现有的液相色谱-质谱联用仪类型：液相色谱-质谱联用仪（1100LC-MSDTrapXCT，Agilent，科学楼7楼）三重四极杆质谱联用仪（TSQQuantumAccessMAX，ThermoFisher，科学楼8楼）微流控芯片液相质谱串联仪（1260LC,1200NanoHPLC-Chipcube-QTOF6520，Agilent，科学楼8楼）液相色谱-质谱联用仪第38页，共72页，星期日，2025年，2月5日*在线真空脱气机二元或四元梯度液相泵自动进样器柱温箱二极管阵列检测器液相色谱-质谱联用仪（1100LC-MSDTrapXCT）离子阱质谱仪第39页，共72页，星期日，2025年，2月5日*ESI电离源APCI电离源离子源：ESI和APCI第40页，共72页，星期日，2025年，2月5日*什么是MSn?该方式是表明多级离子分离和碎裂步骤可产生离子质谱图。n=分离和碎裂步骤数目，最小是1（最后一步是全扫描).e.g.MS3意义1)一个母离子的分离和碎裂2)由前级碎裂得到的子离子的分离和碎裂3)全扫描质谱分析质量分析器：离子阱（iontrap）第41页，共72页，星期日，2025年，2月5日*累积第一级离子分离第一级离子碎裂第二级离子分离第二级离子碎裂第三级质谱分析MassA+A1+A2+A3+A4+A2+A11+A21+A31+A41+A11+A21+A31+A41+MS1MS2MS3MS3的图解第42页，共7