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**标准曲线的应用黄冈市食品药品检验检测中心2017.101标准曲线的定义23标准曲线的要求4标准曲线的制作标准曲线制作的注意事项目录Contents前言PREFACE标准曲线是做什么的呢？方法验证物质的量或浓度的测定标准物质的物理/化学属性跟仪器响应之间的函数关系。目的：是推导待测物质的量。校准曲线：包括标准曲线和工作曲线标准曲线：用标准溶液或标准品直接配制、绘制，不经过预处理。工作曲线：与样品的测定步骤完全一样，经过预处理。校正曲线：是计量学上的一个名词，是根据测定值与真值之间的偏差（校正值）绘制的曲线。DCBA回归方程（a,b）相关系数（r）趋势线（线性）坐标（x,y）E范围x,y01020304标准曲线的坐标：浓度或质量，自变量，可控，误差小吸光度或峰面积等随机变量，由仪器测定得到，是误差的主要来源由于误差的存在，实验点（坐标点）往往不在一条直线上，而是呈现出散点图，但是，我们可以通过特定的软件来进行拟合，使之成为一条直线，以便于查读或计算。线性：指量与量之间按比例、成直线的关系，在数学上可以理解为一阶导数为常数的函数；非线性(non-linear)则指不按比例、不成直线的关系，一阶导数不为常数。1标准曲线的线性：2相关系数（r）01当r＝1，y,x完全线性函线关系，实验误差接近零。02相关系数r＝0.995时，置信度为95%。03当r＝0~1，y与x有不同程度的相关性，逾接近1，线性越好。04当r＝0，y,x完全不存在直线关系。05相关系数r＝0.999时，置信度为99%。06相关系数r＝0.9999时，置信度为99.9%。07相关系数r＝0.985时，置信度为90%。相关系数（r）R2线性范围01在符合线性要求基础上的测定范围。所谓线性范围是指利用一种方法取得精密度、准确度均符合要求的试验结果，而且成线性的供试物浓度的变化范围。也就是其最大量与最小量之间的间隔。02线性范围不是完全固定的，主要是要使被测物质的点落在范围内。0304030102回归方程：斜率y=ax+b斜率，亦称角系数，表示一条直线相对于横轴的倾斜程度.是直线与x轴的夹角α的正切--tanα回归方程是根据样本资料通过回归分析所得到的反映一个变量（依变量）对另一个或一组变量（自变量）的回归关系的数学表达式。回归方程：斜率计算公式：k=(y2—y1）/(X2—X1)y=ax+b回归方程：斜率y=ax+bk=(y2—y1）/(X2—X1)?900固定1800900900负值正值0斜率的变化趋势y=ax+b一次函数y=kx+b，则b就是在Y轴的截距回归方程：截距直线l与x轴交于点A(a,0),与y轴交于点B(0,b)则a叫作直线l的横截距，b叫作直线l的纵截距。截距和距离不同，截距的值有正、负、零，而距离是非负数标准曲线的浓度范围应覆盖正常操作条件下的被测量范围5%调整的方法：1.重做标准曲线，使样品点落在曲线范围内（重选浓度点）；2.改变样品的浓度；3.增加或减少进样量。范围r≥0.995，否则除非标准有规定，应重做标准曲线重做的时候可以采取规范操作、增加浓度点、准确称取或量取等方法1.相关系数1标准样品的组分尽量与被测样品组分一致2纯度3斜率4斜率通常不作要求，但如果过大或过小，直线趋于直立或水平，则会导致结果失真；部分标准对斜率有要求的，说明斜率对结果影响较大，符合要求方能测定样品。截距01截距不超过100%样品浓度的2%如：吸光度：一般样品为0.5，截距不能大于0.5×2%＝0.01如果截距太大，只能重做标准曲线如果截距为负数，更容易导致结果偏差。02一般5个，点越多不确定度越小浓度点标准样品的个数至少应有3个浓度通常不过原点，除非含量限低。标准样品的浓度值应等距离的分布在被测量范围，每个标准点至少重复2次。标准曲线的制作方法直接用标准品配制、测定在阴性样品中加入标准品配制、测定（基质多、步骤多的样品）在样品中加入标准品配制、测定利用仪器的自动配制功能，通过进样量来控制简单准确准确、复杂，有局限快速，线性好，不准确，不推荐用标准品按样品同步配制、测定准确，计算复杂考虑了试剂的影响浓度点的选择应能包括待测样品，可选择5种浓度。浓度差距最好是成倍增加或等级增加，并应与被测液在同样条件下测定。测定读或测两次，求其平均值，以减少仪器不稳定而产生的误差样品