育种出发菌的分离筛选.pptVIP

变色圈法：**透明圈法**可采用固体平板变色圈法。脂酶产生菌的分离：**甘油三丁酸脂为底物，罗丹明B为指示剂，观察荧光圈；制备维多利亚蓝乳脂琼脂培养基(pH7.0)，将样品涂布在平板上培养，阳性反应由粉红色变为蓝色。改良双层法：平皿底层倒一层营养琼脂，把一片浸有被维多利亚蓝染色的乳脂的圆纸片铺在上面，然后覆盖一薄层含样品营养琼脂，保温培养，阳性反应为蓝色。4组织分离法是从一些罹病组织或特殊组织中分离菌株的方法。①对一般患病组织的分离方法取样无菌水洗涤表面消毒无菌水洗涤表面植入平板，培养镜检，分离纯化菌种是发酵工业生产的关键！有初筛和复筛两个步骤。三江平原简介????三江平原是松花江、黑龙江和乌苏里江三条江形成的冲积平原，故名“三江平原”。三江平原雨量充沛，热量充足，土壤主要为沼泽土、草甸土、暗棕壤和黑土，土质肥沃。平原上有20多条主要河流，多数河床狭窄，河道弯曲，甚至是没有明显河槽的沼泽性河流，宣泄不畅。这里的沼泽多发育在靠近山地的低洼地区以及平原上的低洼河漫滩上。这里地势低平，坡度极缓，汇水条件好。这里的沼泽多为潜育化沼泽，约占沼泽面积的85%，泥炭沼泽少，仅占15%，但泥炭储量丰富。泥炭是一种自然资源，可用于农业、工业和医药卫生以及建筑业。沼泽中还有一部分芦苇沼泽，面积逾66万公顷，芦苇蕴藏量约40万吨，是造纸和人造纤维的重要原料。此外，沼泽中还有不少药用植物。另外，三江平原的地下煤炭资源也十分丰富。三江平原经过多年改造、耕作，已经成为黑龙江省的重要商品粮基地之一。

暗棕壤是在温带湿润季风气候和针阔混交林下发育形成的，剖面构型为O-AB-Bt-C，表层腐殖质积聚，全剖面呈中至微酸性反应，盐基饱和度60-80%，剖面中部粘粒和铁锰含量均高于其上下两层的淋溶土。暗棕壤又名暗棕色森林土，过去曾一度被称为棕色灰化土、灰棕壤。直到1960年，经第一次全国土壤普查，才正式确立为暗棕色森林土即暗棕壤。褐色土即“褐土”，又称“褐色森林土”。亚热带地中海型气候区常绿硬叶林下与暖温带旱生森林、灌木林下发育的地带性土壤。主要分布于地中海沿岸、黑海周围及亚洲东部。在中国，分布于华北和西北东南部的山地和盆地中，在水平分布上位于棕壤地带以西，在垂直分布上位于山地棕壤带之下。成土过程主要表现为以残积粘化为主的粘化作用和碳酸盐（即石灰）的淋溶淀积作用。剖面分异明显，由三个基本层段组成：腐殖质层，厚10—15厘米，呈灰棕色粒状或团块状结构，无石灰反应或弱石灰反应；粘化层，厚40—70厘米，褐色，质地粘重而紧实，核块状结构，结构面上常有暗红色胶膜；钙积层，呈黄棕色，石灰多呈斑状、假菌丝状、结核状。在褐土向棕壤过渡地区，因淋溶作用较强，剖面中无明显的石灰淀积，缺乏钙积层。褐土一般呈中性至微碱性反应，表层有机质含量多在3—5%，阳离子交换量每百克土15—22毫克当量，交换性盐基以钙、镁为主。粘化层粘粒含量达20—30%，比上下土层高1—2倍，粘粒硅铁铝率为2.4—2.8，粘土矿物主要是水云母、蛭石。褐土依其发育阶段和特征不同，可分为淋溶褐土、普通褐土、碳酸盐褐土。褐土土层较深厚，自然肥力较高，历来是中国的耕作土壤，但其分布地区易受春旱影响，故需发展灌溉。分解纤维素或产纤维素酶的微生物，纤维素丰富环境嗜碱微生物，碱性环境脂肪水解菌，淀粉水解菌，纤维素、淀粉、蛋白水解菌，产嘌呤菌，拮抗菌分解底物后pH值变化，颜色变化罗丹明不透明粉红色橘黄色荧光分离解脂细菌培养基（％）：牛肉膏0.5g;蛋白胨0.5g;大豆油5.0g;维多利亚蓝4mg第五章育种出发菌的分离筛选菌种来源的途径**从一些发酵制品中分离目的菌株。容易筛选到较理想的菌株。由自然界采集样品中获得。如土壤、水、动植物体等，从中进行分离筛选。容易发现新的菌株资源。向菌种保藏机构索取有关的菌株。国内外著名的菌种保藏机构有：CCCCM(中国微生物保藏管理委员会）ATCC(美国典型菌种保藏中心）NCTC(英国国家典型菌种保藏所)IFO(大阪发酵研究所)菌株分离与筛选菌株分离(separation)：是将样品中混杂生长的各种微生物通过分离技术区分开，获得所需微生物的过程。菌株筛选(screening)：在目的菌株分离的基础上，结合常规生产性能测定，选择目的产物合成能力相对高的菌株的过程。12菌株分离和筛选**主要内容**第一节含微生物样品的采集第二节含微生物样品的富集培养第三节微生物的分离第四节野生菌株筛选和目的产物鉴定第一节含微生物样品的采集**含微生物样品的采集01从