DB3401_T 314-2023 西瓜抗白粉病鉴定技术规程.docxVIP

ICS67.08CCSB32

3401

安徽省合肥市地方标准

DB3401/T314—2023

西瓜抗白粉病鉴定技术规程

Technicalcodeofpracticeforevaluationofwatermelonresistance

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2023-12-15发布2023-12-15实施

合肥市市场监督管理局发布

Q/LB.□XXXXX-XXXX

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由合肥市农业农村局提出并归口。

本文件起草单位：安徽省农业科学院园艺研究所、合肥丰乐种业股份有限公司。

本文件主要起草人：严从生、洪秀景、张其安、王浩波、方凌、江海坤、俞飞飞、王艳、王明霞、马绍鋆、贾利、葛治欢、范家萌、徐丽媛。

DB3401/T314—2023

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西瓜抗白粉病鉴定技术规程

1范围

本文件规定了西瓜抗白粉病鉴定的原理、方法及抗病性评价方法。

本文件适用于西瓜抗白粉病室内苗期抗病性鉴定。

2规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件。

3术语和定义

NY/T3626界定的术语和定义适用于本文件。

4材料与方法

4,1材料

4.1.1病原菌

单囊壳白粉菌（Podosphaeraxanthii）生理小种2France。

4.1.2西瓜品种

鉴定品种：待鉴定西瓜品种。

对照品种：抗病对照品种为西瓜抗白粉病种质PI482246，感病对照品种“早佳”和其他待鉴定品种。

4.1.3培养基

马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）、马铃薯葡萄糖培养液（PDB）、麦粒沙培养基。

4.1.4其他材料

培养皿（直径大小为90mm）、250mL三角瓶、试管、镊子、酒精灯、脱脂棉、育苗盘等实验耗材；

恒温培养箱、超净工作台、高压灭菌、冰箱、可控温温室、微波炉、电磁炉、摇床、离心机等实验仪器。

4.2方法

4.2.1PDA培养基制备

称取洗净去皮的马铃薯200g，切成小块，加水1000mL，煮沸0.5h，纱布过滤，加入琼脂粉15g，加热彻底溶化后，再加入葡萄糖15g，搅拌均匀并溶解后，加水至总体积为1000mL，分装于250mL三角瓶；121℃、0.1MPa，灭菌20min，随后倒入90mm培养皿备用。

4.2.2PDB培养液制备

2

PDA培养基中不加入琼脂粉，制备方法和流程与4.2.1相同。

4.2.3病原菌扩繁

取保存在－80℃的西瓜白粉病病原菌，用PDA培养基28℃条件下复苏2d，待菌落长出后再转接到新的PDA培养基上生长，培养7d～10d备用。

4.2.4喷雾法孢子悬浮液的制备

取生长旺盛的西瓜白粉病病原菌菌丝，接种于PDB液体培养基中，在28℃摇床里振荡培养7d~10d后，将振荡培养后的菌液用双层纱布过滤，去掉菌丝，滤液以3000r/min离心，去除上清液，用无菌水重悬，用血球计数板统计病原菌孢子的数目，调至孢子悬浮液浓度为1×106个/ml，现用现配。

4.2.5

4.2.5育苗

用47％春雷霉素·王铜可湿性粉剂按1000倍加入55℃温水中浸种6h，用干净的湿纱布包好，置于28℃催芽，待种子胚根长至0.5cm、85％的种子露白后播种。播种时，将种子轻轻放入培养钵或育苗盘，覆盖潮土lcm，温度控制在25℃~30℃的可控温室。育苗到3叶或4叶期时形成鉴定和对照材料备用。

4.2.6接种

采用PDA培养基繁殖病原菌，再用PDB培养基扩大培养，制备孢子悬浮液，需要鉴定的品种直接播种于无菌基质中，同时播种对照品种。选取3叶或4叶期生长状态一致、健壮的待鉴定西瓜幼苗，用制备的1×106个/ml孢子悬浮液均匀喷洒植株叶面。设无菌水喷雾叶面接种为对照。

5鉴定

5.1选择材料

选取生长健壮、长势一致的待鉴定材料、抗病材料和感病材料各20株幼苗，重复3次，分别放置，用于抗病性鉴定。

5.2接种后幼苗培养

接种后的待测材料在温室生长，温度控制在25℃~30℃,正常管理。

5.3调查

5.3.1调查时间

接种后第10d开始调查，每隔5d调查一次，直至感病对照品种发病率达80％止。

5.3.2调查方法

记录待测材料品种的发病情况，健康株数及总株数等记入西瓜抗