TCVMA 181-2024 猫杯状病毒感染诊断技术规范.docx

ICS11.220

CCSB41

团 体 标 准

T/CVMA181—2024

猫杯状病毒感染诊断技术规范

TechnicalSpecificationfordiagnosisoffelinecalicivirusinfection

2024-9-9发布 2024-9-9实施

中国兽医协会 发布

T/CVMA181

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前 言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由中国农业科学院北京畜牧兽医研究所提出。

本文件由中国兽医协会归口。

本文件主要起草单位：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所、上海基灵生物科技有限公司、东莞博盛生物科技有限公司、北京市动物疫病预防控制中心、北京动物园管理处、山东省动物疫病预防与控制中心、潍坊市动物疫病预防控制中心、上海市动物疫病预防控制中心、广州源博医药科技有限公司、江苏农牧科技职业学院。

本文件主要起草人：梁瑞英、梁琳、汤新明、丁家波、侯绍华、朱旭、王弋、刘昕、张启龙、贾婷、刘存、刘砚涵、孙燕、赵洪进、赖强、郝福星。

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8 猫杯状病毒的PCR检测8.1 仪器

8 猫杯状病毒的PCR检测

8.1 仪器

8.1.1 PCR扩增仪。

8.1.2 高速台式冷冻离心机。

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猫杯状病毒感染诊断技术规范

范围

本标准规定了猫杯状病毒感染的流行病学和临床症状的诊断依据，以及猫杯状病毒PCR及荧光PCR实验室检测的技术要求和操作规范。

本文件适用于猫杯状病毒感染的诊断。

规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法

GB19489 实验室生物安全通用要求

GB/T27401 实验室质量控制规范动物检疫

NY/T541 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范

术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

缩略语

下列缩略语适用于本文件。

FCV：猫杯状病毒（FelineCalicivirus）

PCR：聚合酶链式反应（PolymeraseChainReaction）

TAE缓冲液：三羟甲基氨基甲烷_乙酸_乙二胺四乙酸（TrisAcetate-EDTAbuffer）TBE缓冲液：三羟甲基氨基甲烷_硼酸_乙二胺四乙酸（Tris-Borate-EDTAbuffer）Ct值：循环阈值（Cyclethreshold）

诊断原则

猫杯状病毒感染的诊断以病原学检测为主，结合流行病学史、临床症状进行综合分析，做出诊断。流行病学史和临床症状是FCV感染的重要诊断依据，病例确诊需严格的病原学检测依据。

诊断依据

流行病学

患猫发病前不久接触过FCV病猫或无症状感染猫或患病猫使用过的用具。

患猫发病前有过生活环境的改变，比如寄养、更换住处、运输、进入多猫环境或去过医院。

收容所、猫舍等群养猫中出现了群发性呼吸道疾病，尤其在新引进猫后，未注射疫苗的猫症状更严重。

流浪猫或户外活动的猫发生呼吸道疾病。

临床症状

患病猫出现精神不佳、食欲下降、具有发热症状的猫可出现精神沉郁、嗜睡和食欲不振等症状，部分猫精神和食欲无异常。

打喷嚏、口腔鼻腔炎症、流涎、眼鼻分泌物增多等症状至少出现一种。

少数病例出现跛行，面部、足部出现脱毛、水肿、溃疡，脱水、死亡中的一种或一种以上的症状。

结果判断

患病猫出现6.1和6.2的任一项，可初步判定为猫杯状病毒感染的临床疑似病例，需要进一步做实验室诊断。

样品采集、保存、运输及处理

样品采集

将无菌棉拭子用灭菌生理盐水充分浸润，采集眼、鼻和口腔样本。眼部应采集结膜囊内黏膜分泌物；深入鼻腔内部贴壁采集鼻腔黏膜分泌物；口腔应尽量采集咽喉深处黏膜分泌物。将采集后拭子放入已装好病毒保存液的商品化样品收集管内（也可使用等渗盐溶液、组织培养液或磷酸盐缓冲液），折断手柄，随即密封，即完成采样，编号并填写相应采样单，样品尽快送检，送检时添加冰袋保持低温。

样品保存及运输

用于病毒核酸检测的样品应尽快送检，24h之内检测的样本可置于4℃保存，24h内无法检测的样本于-70℃或以下保存，如无-70℃保存条件，可置于-20℃冰箱暂存。

样品处理

取7.1收集的眼、鼻、口拭子保存液