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卤化酶的催化机制与定向改造研究
目录
卤化酶的催化机制与定向改造研究（1）．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
一、内容概括．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
1.1研究背景．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
1.2研究意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5
1.3研究目的．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6
二、卤化酶基础知识．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6
2.1卤化酶的分类．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．7
2.2卤化酶的结构特征．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8
2.3卤化酶的活性中心．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9
三、卤化酶的催化机制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．9
3.1催化机制概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．10
3.2电子传递与质子转移．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11
3.3酶-底物相互作用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12
3.4催化循环与中间产物．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13
四、卤化酶的定向改造研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13
4.1定向改造方法概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．13
4.2酶活性位点改造．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．14
4.3酶稳定性改造．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15
4.4酶底物特异性改造．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15
五、实验方法与技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．16
5.1常用实验技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17
5.1.1蛋白质表达与纯化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．17
5.1.2酶活性测定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18
5.1.3X射线晶体学．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19
5.1.4基因编辑技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．19
5.2高通量筛选与优化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20
六、案例研究．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21
6.1案例一．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21
6.2案例二．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．22
6.3案例三．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23
七、总结与展望．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24
7.1研究总结．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．24
7.2存在的问题与挑战．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25
7.3未来研究方向．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．25
卤化酶的催化机制与定向改造研究（2）．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26
内容综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26
1.1研究背景及意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．
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