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·1662·ChineseJournalofPathophysiology2010,26(8):1662-1664
[]1000-4718(2010)08-1662-03
＊
1,31111122■1■
冯年花,谢安,娄远蕾,阮琼芳,郭菲,杨阳,潘长福,邓志锋,汪泱
123
(,,,330006)
[]:(iPS)(NSCs)。:
iPS4d(EB)(RA)4d,EB
。,RT-PCRiPSNanog、Oc4tSox2
,NSCsNestin、β-tubulinⅢGFAP。
:(1)iPS,Nanog、Oc4tSox2,
EB;(2)RAEB1d,;3d,
rosette,rosette7d。rosette。
rosette,。nestin。
β-tubulinШGFAP。:RAiPS
NSCs。
[];;;
[KEYWORDS]Inducedpluripotentstemcell;sNeuralstemcells;Retinoicacid;Human
[]Q813;R318[]Ado:i10.3969/.jissn.1000-4718.2010.044
(inducedpluripotentstemcell,siPSOlympus。
),2
[1]TM
(embryonicstemcell,sESCs),2.1培基iPS:KnockoutDMEM
。iPS(neural、20%Knockout、1%、1mmol/LL
stemcell,sNSCs)-、0.1mmol/Lβ-、4μg/LbFGF。
,。(retinoicacid,(embryoidbody,EB):bFGFiPS。
RA),iPS:DMEM、10%。
NSCs,iPSNSCs:DMEM/F12,20μg/LEGF,10μg/LbFGF,2%
。B27,10μg/LLIF,2mg/L。
2.2人iPS细胞的传代培iPS10
mg/LC(mouse
1embryonicfibroblas,tMEF),iPS。
1.1细胞系iPS-S,1g/LⅣ15-20min,
[2],3-5mL,,
。
TM。
1.2主要试剂ESCsKnockoutDMEM、
Knockout、DMEM、DMEM/F122.3人iPS细胞向NSCs分化
、、L-、β-、①EBiPS
(basicfibroblastgrowthfacto,rbFGF),30min,,,
Gibco;;β-EB,
tubu
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