2025年Pcr复习考试题库.pdf

1.在基因扩增检验中，要使用带滤芯吸头吸加液体，主要是为了

A.防止吸液时产生的气溶胶对加样器前端的污染控制吸液量

B.控制吸液量

C.止吸液时液体对加样器前端的污

D.以上全是

正确答案:A

解析：在基因扩增检验中，使用带滤芯吸头吸加液体的主要目的是为了防止吸液时产生的

气溶胶对加样器前端的污染。滤芯吸头的设计可以有效过滤掉气溶胶颗粒，从而保护加样

器的纯净度和实验的准确性。虽然控制吸液量也是实验过程中的一个重要环节，但并非使

用带滤芯吸头的主要原因。同样，防止液体对加样器前端的污染也是实验操作的一个要

求，但这一要求并非仅通过使用带滤芯吸头来实现。因此，选项A正确描述了使用带滤芯

吸头的主要目的。

2.PCR是在引物、模板和四种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成

反应，其特异性决定因素为

A.模板

B.引物

C.dNTP

D.镁离子

正确答案:B

解析：PCR反应的特异性主要由引物决定。引物是按照与待扩增DNA区段两端序列互补的

原则设计的，它们能够特异性地识别并结合到模板DNA的特定位置上。PCR扩增过程中，

每一条新生DNA链的合成都是从引物的结合位点开始，并沿着模板链延伸。因此，引物的

序列决定了PCR反应能够特异性地扩增出目标DNA片段。

3.如果反应体系中加入模板DNA分子100个，则经过30个循环后，DNA分子的数量将达

A.100×30

B.100×30×2

C.100×302

D.100×230

正确答案:D

解析：在PCR（聚合酶链反应）过程中，每一个DNA模板分子在每个循环中都会复制成两

个相同的分子。因此，如果开始时有100个DNA模板分子，并且进行了30个循环的复

制，那么最终的DNA分子数量将是初始数量（100个）乘以2的循环次数（30次）次方，

即100×2^30。这是指数增长的特点，所以正确答案是D。

4.PCR技术扩增DNA，需要的条件是①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶

等⑤mRNA⑥核糖体

A.①②③④

B.②③④⑤

C.①③④⑤

D.①②③⑥

正确答案:A

解析：PCR技术，即聚合酶链式反应，是用于扩增特定DNA序列的分子生物学技术。其基

本原理是DNA复制，需要几个关键组件：目的基因作为模板，引物来启动复制，四种脱氧

核苷酸作为原料，以及DNA聚合酶来催化反应。根据这些知识点，我们可以分析每个选

项：-①目的基因：必需，作为扩增的模板。-②引物：必需，用于启动DNA复制。-③四

种脱氧核苷酸：必需，作为DNA合成的原料。-④DNA聚合酶：必需，催化DNA链的延

伸。-⑤mRNA：非必需，PCR不涉及转录过程。-⑥核糖体：非必需，PCR是DNA水平的扩

增，不涉及翻译。综上所述，正确的条件是①②③④，即选项D。

5.在实际工作中，基因扩增实验室污染类型包括

A.扩增产物的污染

B.天然基因组DNA的污染

C.试剂污染和标本间交叉污染

D.A、B、C都可能

正确答案:D

解析：这道题考察的是对基因扩增实验室污染类型的理解。在基因扩增实验中，污染是一

个需要严格控制的问题。污染类型主要包括扩增产物的污染、天然基因组DNA的污染，以

及试剂污染和标本间的交叉污染。这些都是实验室中常见的污染来源，因此所有选项A、

B、C都是可能的污染类型。所以答案是D，即A、B、C都可能。

6.TaqDNA聚合酶酶促反应最快最适温度为

A.37℃

B.50-55℃

C.70-75℃

D.80-85℃

正确答案:C

解析：这道题考察的是对TaqDNA聚合酶酶促反应特性的了解。TaqDNA聚合酶是一种耐高

温的DNA聚合酶，其酶促反应的最适温度范围是关键知识点。根据酶学知识，TaqDNA聚合

酶的最适反应温度通常在70-75℃之间，这使得它特别适用于PCR（聚合酶链式反应）中

的高温变性步骤。因此，选项C“70-75℃”是正确答案。

7.以下哪种物质在PCR反应中不需要

A.TaqDNA聚合酶

B.dNTPs

C.镁离子

D.RNA酶

正确答案:D

解析：在PCR（聚合酶链式反应）过程中，主要目的是通过DNA聚合酶的作用，在体外条

件下扩增特定的DNA片段。A选项的TaqDNA聚合酶是PCR中常用的热稳定DNA聚合酶，用

于催化DNA链的延伸。B选项的dNTPs（脱氧核苷三磷酸）是DNA合成的原料。C选项的镁

离子是DNA聚合酶发挥催化作用所必需的辅助因子。而D选项的RNA酶会降解RNA，但在

PCR反应中并不需要RNA的参与，且RNA酶会破坏DNA模板，因此不需要RNA酶。