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动物细胞培养技术应用教学课件

一、动物细胞培养技术概述

1.定义：动物细胞培养技术是指在体外模拟动物体内环境，为细胞提供必要的营养、生长因子、氧气和适宜的温度、湿度等条件，使细胞得以生长、繁殖的技术。

2.分类：根据培养目的和方式，可分为原代细胞培养、传代细胞培养、悬浮细胞培养和贴壁细胞培养等。

二、动物细胞培养的准备工作

1.培养基的选择与配制

常用培养基：DMEM、RPMI1640、MEM等

配制方法：称取适量培养基粉末，加入去离子水，搅拌溶解，调整pH值，过滤除菌，分装保存

2.生长因子的添加

常用生长因子：胰岛素、表皮生长因子、血小板衍生生长因子等

添加方法：按照说明书比例加入培养基中

3.细胞的来源与制备

常用细胞来源：动物组织、胚胎、血液等

制备方法：将组织剪碎，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶消化，离心洗涤，制成细胞悬液

三、动物细胞培养的操作步骤

1.细胞接种

将制备好的细胞悬液接种到培养皿或细胞瓶中

接种密度：根据细胞类型和培养目的确定

接种后，将培养皿或细胞瓶放入培养箱中

2.细胞培养

观察细胞生长状态，定期更换培养基

换液频率：根据细胞类型和生长速度确定

注意观察细胞形态、密度和生长速度等指标

3.细胞传代

当细胞密度达到一定程度时，进行传代

传代方法：将细胞悬液按一定比例分装到新的培养皿或细胞瓶中，继续培养

四、动物细胞培养技术的应用

1.生物制药：利用细胞培养技术生产疫苗、抗体等生物制品

2.基因工程：利用细胞培养技术进行基因转移、基因编辑等研究

3.药物筛选：利用细胞培养技术进行药物筛选和药效评价

4.组织工程：利用细胞培养技术制备组织工程支架和种子细胞

5.生物医学研究：利用细胞培养技术进行细胞生物学、分子生物学等研究

五、动物细胞培养技术的注意事项

1.无菌操作：严格无菌操作，防止细菌、真菌等微生物污染

2.温度和湿度：保持培养箱内温度（37℃）和湿度（95%以上）

3.氧气供应：保持培养箱内氧气充足，有利于细胞生长

4.培养基更换：定期更换培养基，防止细胞代谢产物积累

5.细胞密度：控制细胞密度，避免过度拥挤导致细胞生长受限

6.观察记录：详细记录细胞生长状态、换液时间、传代次数等信息，便于后续分析

六、动物细胞培养技术的展望

1.优化培养基配方，提高细胞生长速度和存活率

2.开发新型细胞培养设备，实现自动化、高通量培养

3.深入研究细胞培养机制，提高培养效果

4.扩大细胞培养技术在生物医学领域的应用范围