有机物结构分析与确定课件.pptVIP

*************************************液相色谱选择性通过调整固定相和流动相实现精确分离适用性适用于非挥发性、热不稳定和高分子量化合物灵敏度现代检测器可实现极低浓度检测液相色谱(LC)，特别是高效液相色谱(HPLC)，是分析非挥发性和热不稳定化合物的首选方法。与气相色谱不同，液相色谱使用液体流动相，不要求样品气化，适用范围更广。常见的HPLC模式包括正相色谱、反相色谱、离子交换色谱、尺寸排阻色谱和亲和色谱等。现代HPLC系统由高压泵、进样器、色谱柱、检测器和数据系统组成。常用检测器包括紫外-可见检测器、荧光检测器、电化学检测器、折光率检测器和质谱检测器。超高效液相色谱(UHPLC)采用小粒径填料和高压系统，进一步提高了分离效率和速度。与气相色谱相比，液相色谱提供更多调整分离选择性的参数，适用于更复杂样品的分析。薄层色谱板的制备选择适当的吸附剂(如硅胶、氧化铝)涂布在玻璃板或铝箔上制成薄层板。根据分析需要，可选择不同厚度和不同改性的薄层板。预先活化薄层板以去除吸附水分，确保分离效果。样品点样将样品溶液以小点状点在薄层板起始线上。点样应精确、集中、不要扩散。可使用微量注射器或毛细管点样。对照品与样品同板点样，便于比较鉴定。展开将点样板放入展开池中，使起始线略高于展开剂液面。展开剂沿薄层上升，组分随溶剂迁移，根据与固定相的相互作用强度不同而分离。控制展开距离，防止过度展开或不完全分离。检测与分析展开完成后取出薄层板，晾干溶剂。可通过显色、荧光、碘蒸气等方法显示分离的组分。根据各组分的保留因子(Rf值)和显色特征进行定性分析。也可进行刮板-溶出操作，回收分离的组分进行进一步分析。色谱-质谱联用技术色谱-质谱联用技术结合了色谱的高效分离能力和质谱的精确结构鉴定能力，成为现代有机物结构分析的强大工具。GC-MS适用于挥发性和热稳定化合物，样品经气相色谱分离后直接进入质谱离子源。LC-MS则通过电喷雾(ESI)、大气压化学电离(APCI)等接口技术，解决了液相流动相与质谱高真空系统的兼容问题，使非挥发性和极性化合物也能进行质谱分析。这些联用技术提供三维信息：保留时间、质谱图和化合物丰度，大幅提高了复杂混合物分析的可靠性和灵敏度。现代MS/MS技术进一步增强了结构解析能力，通过选择特定前体离子进行二次碎裂，获得更详细的结构信息。这些技术在代谢组学、环境分析、毒理学和药物开发中有广泛应用，能够在复杂基质中检测和鉴定痕量组分。有机化合物官能团鉴定化学鉴定方法基于官能团特异性反应的传统鉴定方法。优点是器材简单、操作方便，适合快速初筛；缺点是消耗样品量较大，可能受其他基团干扰。典型方法包括呈色反应、沉淀反应和气体生成反应等。化学鉴定对样品纯度要求较高，对混合物分析能力有限。光谱鉴定方法基于官能团特征光谱吸收的现代鉴定方法。优点是快速、灵敏、无损，样品用量少；缺点是需要专业仪器和解析经验。主要包括红外光谱、核磁共振和质谱等技术。光谱鉴定能同时获取多种官能团信息，适合复杂结构分析。联用技术结合色谱分离和光谱鉴定的综合技术。优点是能处理复杂混合物，提供分离和结构信息；缺点是技术复杂，成本较高。典型系统包括GC-MS、LC-MS和LC-NMR等。联用技术是复杂样品分析的首选方法，特别适合微量和未知化合物的结构鉴定。羟基化合物的鉴定化学方法羟基化合物的化学鉴定主要基于羟基的酸性和还原性，以及与特定试剂的反应。醇的鉴定：金属钠反应(放出H?)；碘仿反应(仅适用于含CH?CH(OH)-基团的醇)；与乙酸酐反应生成醋酸酯(有特征香味)酚的鉴定：与FeCl?反应(产生特征颜色)；与溴水反应(形成沉淀)；与碱溶液反应(酚羟基的酸性)多羟基化合物：焦铜试验(多元醇)；间苯三酚反应(对邻二羟基)分类测试：鉴别伯、仲、叔醇的卢卡斯试剂(ZnCl?-HCl)和铬酸氧化试验光谱方法羟基化合物的光谱鉴定提供更精确的结构信息，不受其他官能团干扰。红外光谱：OH伸缩振动在3650-3200cm?1(宽峰)；C-O伸缩在1300-1000cm?1；不同类型羟基化合物的IR特征模式不同核磁共振：OH质子的化学位移在δ1-5ppm，受氢键影响较大；与D?O交换可确认OH信号；13CNMR中C-OH碳的化学位移具特征性质谱：醇类通常有M-18(失水)的特征碎片；酚类则常见M-1峰；TMS衍生化可增强质谱响应醛酮化合物的鉴定化学鉴定方法醛酮化合物含有羰基(C=O)，能与含氮试剂形成加成产物，且醛类具有还原性。常用鉴定方法包括：2,4-二硝基苯肼试验(形成黄色或橙红色沉淀)；席夫试剂反应(醛类显紫红