DB22_T1619-2012_牛尿中盐酸克伦特罗残留量的测定液相色谱-质谱_质谱法_吉林省.docxVIP

ICS67.050

B04

DB22

备案号：35747-2013

吉

林

省地

方

标

准

DB22/T1619—2011

牛尿中盐酸克伦特罗残留量的测定

液相色谱-质谱/质谱法

吉林省质量技术监督局

发布

DB22/T1619—2012

前

言

本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2001给出的规则起草。

本标准由吉林出入境检验检疫局提出并归口。

本标准起草单位：吉林出入境检验检疫局检验检疫技术中心。

本标准主要起草人：马书民、张勋、赵庆松、杨璐、胡婷婷、康明芹、王明泰、荣会。

I

DB22/T1619—2012

牛尿中盐酸克伦特罗残留量的测定

液相色谱-质谱/质谱法

1范围

本标准规定了牛尿中盐酸克伦特罗残留量的液相色谱-质谱/质谱测定方法。

本标准适用于牛尿中盐酸克伦特罗残留量的测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。

3原理

本方法采用高氯酸溶液沉淀蛋白，氢氧化钠溶液调节pH值后，用乙酸乙酯萃取，样液经浓缩后过

混合型阳离子交换固相萃取柱净化，液相色谱-质谱/质谱仪测定，外标法定量。

4.6高氯酸：含量为70%～72%。

4.90.1mol/L高氯酸溶液：0.83mL高氯酸溶解于100mL水中，混匀备用。

4.101mol/L氢氧化钠溶液：称取4gNaOH，溶于100mL水中，混匀备用。

4.110.1%甲酸溶液：准确吸取1mL甲酸（4.5），用水定容至1L，混匀后备用。

4.1250%甲醇溶液（50+50）：50mL甲醇（4.4）与50mL水混匀。

4.135%氨化甲醇（95+5）：95mL甲醇（4.4）与5mL氨水（4.7）混匀。

4.14标准储备溶液：准确称取适量的标准品，用甲醇(4.4)配制成100.0mg/L的标准贮备液，在0℃～

4℃冰箱中保存。

4.15标准工作溶液：根据需要用甲醇(4.4)稀释配制适当浓度的标准工作液，现用现配。

4.16有机相微孔滤膜：0.22μm。

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4.17混合型阳离子交换固相萃取柱（MCX固相萃取柱）：60mg/3mL。使用前依次用3mL甲醇、3mL

水活化。

5仪器与设备

5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配备电喷雾离子源（ESI）。

5.2氮吹仪。

5.3旋转蒸发器。

5.4天平：感量0.0001g和0.01g。

5.5涡旋混合器。

5.6离心机：转速大于7000r/min。

6分析步骤

6.1提取

取5mL样品（精确到0.1mL）于50mL离心管中，加入5mL高氯酸溶液（4.9）于涡旋混合器上

充分混合，用1mol/LNaOH溶液调节溶液的pH值至9.5±0.1，加入20mL乙酸乙酯，涡旋振荡混匀。4℃

条件下10000r/min离心5min，重复提取三次，合并乙酸乙酯相，放入浓缩瓶中，35℃旋至近干，用5mL

0.1%甲酸溶液(4.11)定容，待净化。

将上述样液过MCX柱净化，依次用5mL甲醇（4.4）、5mL水和5mL0.1%甲酸水溶液(4.11)对柱子

进行预处理，将样品溶解液以1.0mL/min的流速加载在MCX（4.17）小柱上，再依次用5mL0.1%甲酸溶

液、5mL水、5mL50%甲醇(4.12)洗柱，弃去淋洗液；真空抽干MCX柱2min，用5mL5%氨化甲醇（4.13）

进行洗脱，收集洗脱液。洗脱液在45℃下氮气流吹干，加入1mL乙腈：0.1%甲酸溶液（30:70）溶解残

渣，过0.22μm滤膜，进行HPLC-MS/MS测定分析。

除不称取试样外，均按6.1和6.2进行。

6.4测定

a)离子源：电喷雾离子源（ESI）；

2

DB22/T1619—2012

b)扫描方式：正离子扫描，检测方式：多反应监测（MRM）；

c)电离电压：3kV～5kV；

d)

离子源温度：300℃～550℃；

e)脱溶剂气：0.21MPa；

f)雾化气：0.31MPa；

g)辅助气：0.31MPa；

h)定性离子对、定量离子对、去簇电压、碰撞能量见表1。

表1盐酸克伦特罗选择监测离子(m/z)、碰撞气能量及去簇电压参数

碰撞气能量

（eV）

去簇电压

名称

定量离子对

定性离子对

(V)

411.2﹥203.0

411.2﹥259.0

25

25

盐酸克伦特罗277.0﹥203.0

50

6.