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新冠疫情监测核酸提取室工作流程

一、制定目的及范围

为有效应对新冠疫情，确保核酸检测的准确性与高效性，特制定本核酸提取室工作流程。本流程适用于疫情监测、核酸检测实验室的所有工作人员，涵盖样本接收、处理、核酸提取及结果记录等环节，旨在提高工作效率、确保实验安全及减少交叉污染。

二、工作原则

1.核酸提取工作必须遵循“规范化、安全性、及时性”的原则，确保检测结果的准确和可靠。

2.所有操作人员需经过专业培训，熟悉操作规程和安全注意事项。

3.样本处理过程中要严格遵循生物安全要求，佩戴必要的个人防护装备。

三、工作流程

1.样本接收

1.1样本登记：实验室接收样本后，需填写《样本接收登记表》，记录样本编号、接收时间、样本来源等信息。

1.2样本检查：核对样本状态，确保样本无损坏、未过期，并确认样本类型与登记信息一致。

1.3样本分类：将样本根据类型进行分类，分为鼻咽拭子、唾液样本等，以便后续处理。

2.样本预处理

2.1准备工作：在进行样本处理前，需准备好所需的试剂、耗材及设备，确保齐全。

2.2样本稀释：对唾液样本进行适当稀释，确保后续提取步骤顺利进行。

2.3灭活处理：对于可能含有病毒的样本，进行必要的灭活处理，确保操作人员的安全。

3.核酸提取

3.1操作准备：在生物安全柜内进行操作，确保环境洁净，避免样本交叉污染。

3.2添加裂解液：根据样本类型，向样本中添加适量裂解液，充分混匀，裂解细胞释放核酸。

3.3离心：将样本放置于离心机中，按照规定的速度和时间进行离心，分离细胞碎片与上清液。

3.4转移上清：小心转移上清液至新的离心管，避免扰动沉淀部分。

3.5洗涤核酸：向上清液中添加洗涤液，进行多次洗涤，以去除杂质和抑制剂，确保核酸的纯净度。

3.6重悬核酸：最后向核酸沉淀中加入适量的重悬液，轻轻混匀，得到最终的核酸溶液。

4.核酸定量与质量检测

4.1定量检测：使用分光光度计对提取的核酸进行浓度测定，记录结果。

4.2质量评估：通过凝胶电泳检测核酸的完整性，确保提取效果良好。

4.3记录结果：将定量和质量检测结果填写在《核酸提取记录表》中，便于后续追溯。

5.样本存储与处理

5.1短期存储：提取后的核酸样本可在-20℃条件下短期保存，避免反复冻融。

5.2长期存储：对于需要长期保存的样本，应转存于-80℃冰箱中，确保核酸稳定性。

5.3样本归档：所有提取记录和检测结果应归档，便于后续查阅和质量控制。

6.实验室清洁与消毒

6.1设备消毒：使用合适的消毒剂对操作设备和工作台面进行彻底消毒，确保无菌环境。

6.2废物处理：将所有废弃物按照生物废物处理规范进行处理，确保实验室安全。

6.3个人防护：操作结束后，严格按照生物安全要求脱去个人防护装备，并进行手部清洗。

四、备案与记录

所有实验过程中的记录必须完整、准确。包括样本接收登记、核酸提取记录、定量和质量检测结果等，均应及时归档，并接受定期审核。

五、反馈与改进机制

为不断优化工作流程，提取室应建立反馈机制。定期召开工作会议，听取操作人员的意见和建议，针对流程中存在的问题进行讨论和改进。

通过以上流程设计，核酸提取室在新冠疫情监测中的工作将更加规范化和高效化，为疫情防控提供重要支持。