刺龙牙组培快繁技术规程（征求意见稿）.docx

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DB

辽宁省地方标准

DB21/XXXXX—XXXX

刺龙牙组培快繁技术规程

TechnicalregulationforTissueCultureofAraliaelata

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（征求意见稿）

-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施

辽宁省市场监督管理局发布

I

DB××/T××××—××××

目次

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4培养基制备 1

5外植体采集及处理 2

6诱导培养 2

7继代培养 2

8生根培养 3

9炼苗及移栽 3

10苗木质量分级 4

11包装和运输 4

附录A（规范性附录）MS基本培养基配方 5

附录B（资料性附录）刺龙牙组织培养苗木质量分级 6

II

DB××/T××××—××××

前言

本规程的编制规则依据GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由辽宁省林业厅提出并归口。

本标准起草单位：辽宁省森林经营研究所。

本标准起草人：林晓坤、姜冬、常婧、张群野、宋诗雨、张利萍。

本标准发布实施后，任何单位和个人如有问题和意见建议，均可以通过来电和来函等方式进行反馈，我们将及时答复并认真处理，根据实际情况依法进行评估及复审。

归口管理部门通讯地址：辽宁省林业和草原管理局（沈阳市和平区太原街2号），联系电话：024-

文件起草单位通讯地址：辽宁省森林经营研究所（辽宁省丹东市金山开发区新建街600号），联系电话：0415

本标准的附录A为规范性附录。本标准的附录B为资料性附录。

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DBXX/XXXXX—XXXX

刺龙牙组培快繁技术规程

1范围

本标准规定了刺龙牙组织培养的术语和定义、培养基制备、外植体采集及处理、诱导培养、继代培养、生根培养、炼苗及移栽、苗木质量分级及包装和运输等要求。

本标准适用于刺龙牙组织培养育苗生产。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

LY/T1882林木组织培养育苗技术规程

3术语和定义

LY/T1882界定的以及下列术语和定义适用于本文件。

3.1丛芽苗

培养材料在培养基上分化的多个基部相连的带芽小苗。

3.2过滤灭菌

对不耐高温的植物生长调节物质，采用滤膜过滤消除杂菌的方法。

4培养基制备

4.1培养基配方

4.1.1基本培养基

采用MS培养基，具体成分见附录A。

4.1.2诱导分化培养基

MS+6-BA0.5mg/L+蔗糖30g/L。

4.1.3增殖培养基

MS+6-BA1.5mg/L+IAA0.6mg/L+GA30.2mg/L+蔗糖30g/L。

4.1.4生根培养基

1/2MS+IAA0.2mg/L+蔗糖30g/L。

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4.2培养基配制

培养基配制方法参照LY/T1882。

4.3培养基灭菌

4.3.1高压灭菌

将培养基放入高压蒸汽灭菌器内灭菌，灭菌温度121℃,灭菌时间20min。

4.3.2过滤灭菌

添加GA3的培养基，应在高压灭菌后，待培养基冷却至50℃左右，在超净工作台加入经过滤灭菌的GA3。

4.4培养基保存

灭菌后的培养基在干净、阴凉的室内常温平放保存备用。

5外植体采集及处理

5.1母株选择

外植体的供体母株应是刺龙牙良种的优树原株或其无性系分株。

5.2外植体采集

选择无病虫害、生长健壮的植株，以当年生长度30cm～50cm的越冬枝条为材料，晴天下午将材料剪回，于温室水培至刚刚萌发，用刀切下嫩芽（带一块木质部），放在容器中，用流水冲洗干净。

5.3外植体消毒

外植体在超净工作台先用75%乙醇溶液浸泡消毒15s，无菌水冲洗3次，再用0.1%升汞消毒10min，期间不断摇晃，用无菌水冲洗4次～5次，最后无菌滤纸吸干水分，置于无菌不锈钢小盘上。

6诱导培养

6.1外植体接种

在超净工作台上，用已灭菌的镊子和解剖刀剥去外植体鳞片和大部分幼叶，接种于已准备好的诱导分化培养基中，数量