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ICS71.100.70
CCSY42
GDCA
广东省化妆品学会团体标准
T/GDCA013—2021
化妆品–斑马鱼胚胎舒缓功效测试方法
Cosmetics-EvaluationMethodofPalliationEffectinZebrafishEmbryos
(征求意见稿)
在提交反馈意见时,请将您知道的相关专利连同支持性文件一并附上。
XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施
广东省化妆品学会发布
T/GDCA013—2021
化妆品-斑马鱼胚胎舒缓功效测试方法
1范围
本标准规定的方法,属于化妆品原料及产品舒缓功效评价的实验室方法。
本标准规定了斑马鱼胚胎舒缓功效测试的方法。
本标准适用于化妆品原料及产品的舒缓功效的快速检测。
本标准适用于以下特征的受试物:
——受试物能溶解于水、在一定条件下能溶于水或能在水中形成均匀分散的悬浮液。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本
文件。
中华人民共和国国务院令第727号《化妆品监督管理条例(2021)》
国家药监局关于发布《化妆品分类规则和分类目录》的公告(2021年第49号)附件:化妆品分类规
则和分类目录
国家药品监督管理局关于发布《化妆品功效宣称评价规范》的公告(2021年第50号)附件:化妆品
功效宣称评价规范
GB/T603化学试剂试验方法中所用到制剂及制品的制备
GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法
DB32/T3979-2021实验用斑马鱼饲养技术条件
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
舒缓
有助于改善皮肤刺激等状态。
hpf
hourspost-fertilization(hpf):受精后小时数
自旋运动
胚胎在卵膜内呈自发旋转运动,参考附录C。
无可观察效应浓度
与对照组相比,对实验生物未产生显著性效应的最高受试物浓度,即“noobservedeffectconcentration;
NOEC”。
斑马鱼胚胎
0—5dpf,胚胎靠卵黄提供营养的阶段。
斑马鱼胚胎死亡
0—48hpf出现卵凝结,48hpf无法观察到心跳。
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T/GDCA013—2021
4评价方法
斑马鱼行为学分析法
4.1.1原理
斑马鱼胚胎具有极强的敏感性,利用斑马鱼胚胎进行刺激性评价已在环境毒理学中应用,但在化妆
品领域尚无应用。斑马鱼胚胎在发育初期全身透明,胚胎发育至24hpf(Prim-5stage)时会产生自旋运
动。当有鱼胚受到化学刺激后,其产生的自旋运动次数会增多;当加入具有舒缓功效的受试样品后,其
自旋运动次数与模型组对比有显著性降低,通过比较斑马鱼胚胎的自旋运动次数变化对化妆品原料及
产品进行舒缓功效评价。
4.1.2材料与试剂
4.1.2.1斑马鱼胚胎:推荐使用野生型AB品系斑马鱼的鱼卵;
4.1.2.2斑马鱼交配盒;
4.1.2.396孔板;
4.1.2.4EP管(操作者根据实际情况选用不同规格的EP管);
4.1.2.590mm的培养皿;
4.1.2.6助溶剂(如:二甲基亚砜、无水乙醇等);
4.1.2.7缓冲水
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