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年级：2025级生物技术（本科）课程号：2025-2025学年第二学期本科试卷
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填空题（共20分，每空1分）
1.按层析原理分类，纸层析是属于（?）层析，纸层析的支持物为（），固定相是（）。
2.蛋白质含量测定的常用方法有（）、（）、（）、（）和紫外分光光度法。
3.凝胶电泳的一般操作步骤：制胶，加入电泳缓冲液，（），电泳，（），（），脱色。
4.聚丙烯酰胺凝胶电泳具有浓缩效应、（）效应和（）效应。
5.通常可用紫外分光光度法测定蛋白质的含量，这是因为蛋白质分子中的（）、（）、（）三种氨基酸的共轭双键有紫外吸收能力，使蛋白质对280nm的光波具有最大吸收值，在一定范围内，蛋白质溶液的吸光度值与其浓度成正比。
6.在糖酵解中间产物的鉴定实验中，利用（）对糖酵解过程中3-磷酸苷油醛脱氢酶的抑制作用，使3-磷酸苷油醛不再向前变化而积累。（）作为稳定剂，用来保护3-磷酸苷油醛是不自发分解。然后用2，4-二硝基苯肼与3-磷酸苷油醛在碱性条件下形成（）的棕色复合物，其棕色程度与2-磷酸苷油醛含量成正比。
7.脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应产生（）色物质，而其他氨基酸与茚三酮产生（）色的物质。
简答题（共7题，共80分）
1.（10分）实验室测得某物质标准溶液系列浓度0、0.2、0.4、0.6、0.8g/L的吸光度依次为0、0.15、0.35、0.45、0.6，样品稀释100倍后的吸光度为0.5，求样品的浓度是多少？
2.（10分）如何证明提取到的某种核酸是DNA还是RNA？
3.（10分）为什么SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳可以用来测定未知蛋白质的相对分子质量？
4.（10分）考马斯亮蓝G-250法（Bradford法）测定蛋白质含量的原理是什么？
5.（10分）简述福林—酚试剂法测定碱性蛋白酶活力的原理。
6、（15分）在糖酵解中间产物鉴定实验中，各管内颜色有何不同？哪一管最后生成的颜色最深？为什么？如果2号、3号试管颜色差别不明显？试分析其原因。
7.（15分）简述离子交换层析分离氨基酸混合物的方法是根据氨基酸的什么性质?如果选用阴离子交换树脂，并将实验所用缓冲液的pH值选择为6.5，分析在此条件下天冬氨酸和赖氨酸的分离结果？（天冬氨酸的等电点为2.77，赖氨酸的等电点为9.74）
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