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①VAL-Vimentin结合位点
a.构建三种分段截短突变载体③ΔVAL对Vimentin泛素化调控
b.RNApulldown验证交互位点a.MG132抑制剂处理观察ΔVAL
与VAL调节Vimentin表达能力
②ΔVAL影响Vimentin表达及转移
b.CHX抑制剂处理观察ΔVAL与
a.构建结合失活突变体ΔVALVAL影响Vimentin蛋白半衰期
b.验证ΔVAL与VAL调控
Vimentin蛋白表达的差异c.检测K48和K63泛素化水平
c.验证ΔVAL与VAL调控肺d.Trim16过表达条件下重复上
癌细胞转移能力的差异述a/b/c三个泛素化相关实验
④ΔVAL对Vimentin-Trim16结合的竞争性效应
a.ΔVAL与VAL处理co-IP比较b.过表达Trim16，RIP-qPCR评
Trim16与Vimentin结合效应价对Vimentin结合VAL的影响
2.在体水平验证VAL结合3.AKT/STAT3/VAL/Vimentin信
Vimentin调控肺腺癌转移号轴在肺腺癌转移中的临床意义
①构建VAL和ΔVAL过表达的①200例肺腺癌患者肿瘤组织进
肺腺癌稳转细胞株行回顾性研究，qPCR、WB和IHC
检测检测其中AKT、STAT3、VAL
②尾静脉注射肺转移模型验和Vimentin表达
证VAL及ΔVAL功能
②100例AKT持续激活特征的肺
③心脏注射肺腺癌骨转移模腺癌前瞻性研究：新鲜组织标
型验证VAL及ΔVAL功能本、配对癌旁组织及血浆检测其
中STAT3、VAL和Vimentin表达
④VAL与Trim16存在竞争性效
应的在体实验③统计分析：对AKT、STAT3、
VAL和Vimentin表达与临床病理
⑤AKT/STAT3/VAL/Vimentin信因素做单因素/多因素分析和预
号轴的动物水平回复实验后关联分析，明确临床意义
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