分子荧光与磷光光谱分析法.pptVIP

淬灭剂动态淬灭淬灭剂与发光物质激发态分子发生相互作用静态淬灭淬灭剂与发光物质基态分子发生相互作用第29页，共57页，星期日，2025年，2月5日著名的熄灭剂:卤素离子重金属离子氧分子硝基化合物第30页，共57页，星期日，2025年，2月5日卤素离子对于奎宁的荧光有显著的熄灭作用，但对某些物质的荧光并不发生熄灭作用，这表明熄灭剂和荧光物质分子之间的相互是有选择性的。荧光熄灭作用在荧光分析中有着降低待测物质的荧光强度的不良作用，但另一方面，我们可以利用某一物质对某一荧光物质的熄灭作用建立对该物质的荧光熄灭法检测。该法常具有更高的选择性。第31页，共57页，星期日，2025年，2月5日1.碰撞熄灭溶液中荧光物质分子M和熄灭剂Q相碰撞而引起荧光熄灭。比较速率M＋hυ→M*(吸光)1M*→M＋hυ(发生荧光)k1[M*]M*+QM+Q+热k2[M*][Q]第32页，共57页，星期日，2025年，2月5日Stern-Volmer方程式k：熄灭常数[Q]：熄灭剂浓度(M)F0,F分别是熄灭剂Q不存在时及存在时的溶液的荧光强度第33页，共57页，星期日，2025年，2月5日2.组成化合物的熄灭某些荧光物质溶液在加入一些熄灭剂之后，溶液的荧光强度显著降低;随着温度的升高，荧光强度而增强。第34页，共57页，星期日，2025年，2月5日上述情况可能是由于一部分荧光物质分子M与熄灭剂分子Q作用而生成了络合物MQ，如络合物MQ的形成是由于微弱的范德华引力的作用，则所形成的络合物并不发生荧光，且对solu的吸收并不发生任何影响。第35页，共57页，星期日，2025年，2月5日发生荧光的物质仍为M*分子，品种并没有改变，所以荧光分子的平均寿命也没有改变，至于solu温度升高荧光强度之所以增强，可能是由于温度升高时该络合物较不稳定，较多地分解为M和Q分子的缘故。这一点可以作为这一类型熄灭不同于碰撞熄灭的标志。如果络合物MQ的形成是由于强大的力，则络合物MQ将具有它自己的吸光特性，溶液的吸收光谱也将发生改变。第36页，共57页，星期日，2025年，2月5日3.转入三重线级的熄灭EC位E能π*GDπABCBD处于单线态的基态EGF为第一激发单线态虚线为激发三线态第37页，共57页，星期日，2025年，2月5日?当由单线态转移至三线态时，多余的振动能在碰撞中损失掉，solu中绝大多数转入三重线级的分子在一般温度下是不会发光的，它们把多余的能量消耗于它们与其它分子的碰撞之中，因而引起荧光的熄灭。转入三重态的分子在低温下可由三线态重新返回到基态，在这一过程中将放出波长较长的磷光。第38页，共57页，星期日，2025年，2月5日含溴、碘化合物、重氮、羰基、羧基及某些杂环化合物容易转变至三线态，因而易使荧光熄灭。电子自旋方向的改变系有强烈磁场的诱导作用所引起的，在原子核附近，尤其是在Br或I这样重的原子核附近，存在着强烈的磁场，所以含溴、碘的化合物容易使溶液荧光熄灭。第39页，共57页，星期日，2025年，2月5日几乎所有会发生荧光的有机化合物都会被溶解在溶液中的氧分子