动物克隆技术PPT课件.ppt

*在畜牧业生产中，胚胎嵌合技术也大有用武之地。例如，对水貂、狐狸、绒鼠等毛皮动物，利用这项技术可以得到按传统的交配或杂交法无法得到的皮毛花色后代，从而提高毛皮的价值，克服动物间杂交繁殖的障碍，创造出新的物种。

同时，这项技术还可进行异种动物彼此妊娠产仔，加快珍稀动物的繁殖。例如，利用其他动物代替大熊猫妊娠产仔，能够加快它的繁殖速度。也可通过这项技术培育出含有人类细胞的猪，使得猪器官能用作人类器官移植之用。亦可将外源基因导入一种细胞和胚胎相合，生下含有该外源基因的嵌合体动物，并可遗传下去，使它具有重要的研究和应用价值。

目前，科研人员已经嵌合成功的嵌合体动物有小鼠、大鼠、绵羊、山羊、猪和牛等；种间嵌合体动物有大鼠－小鼠嵌合体、绵羊－山羊嵌合体、马－斑马嵌合体、黄牛－水牛嵌合体等。*udder乳腺，Implant移植，surrogate代孕者legacy*盖诺GN???通用名:长春瑞滨、异长春花碱

???英文名：Vinorelbine

???药物类别：抗肿瘤植物类

???药理毒理：本品为广谱抗肿瘤药,是长春碱半合成衍生物,主要通过抑制着丝点微管蛋白的聚合,使细胞分裂停止于有丝分裂的中期,是一细胞周期特异性的药物。*透明带下注射(Subzonalinjection,SUZI)；透明带钻孔(Zonadrilling,ZD)；透明带部分切口(Partialzonadissection,PZD)；卵子胞浆内单精子注射(Intracytoplasmicsperminjection,ICSI)TⅡ期—telophaseⅡ，末期Ⅱ；MⅡ期—metaphaseⅡ，中期Ⅱ*卵裂球blastomere,指由受精卵分裂而生成的形态上尚未分化的细胞。主要指的是从二细胞期到囊胚期之间的形态。*请欣赏精彩的移核过程*****

技术路线——以多莉为例

芬兰多塞特白面母绵羊

苏格兰黑面母绵羊/programs/view/jFrTOOs2xDk/isRenhe=13*多莉和威尔穆特*具体操作取处于后三分之一妊娠期的6岁母绵羊（芬兰多塞特白面绵羊）的乳腺细胞作核供体细胞，用“饥饿法”使其进入休眠状态而使全部基因具有活性。注射促性腺激素GN促使母羊（苏格兰黑面母绵羊）排卵，28－33小时取其未受精卵快速去核，放入10%FCS（小牛血清）、1%FCS和0.5%FCS连续5天，饥饿使进入G0期做受体细胞。*在乳腺细胞注射GN34－36小时后与无核卵放入同一培养皿中，在微电流作用下，将乳腺细胞核融入卵中，形成一个含有新遗传物质的卵细胞。将新的卵细胞植入羊的结扎的输卵管内，6天后发育成桑椹期胚胎或囊胚（8－16个细胞），再移入假孕母羊子宫内。产下多莉即为6岁母羊的复制品，也为白色。**8动物克隆技术的研究现状

及发展方向8.1克隆技术概述8.2哺乳动物克隆的基本过程8.3动物克隆的影响因素8.4克隆技术存在的问题8.5核移植后核重编程研究进展8.6动物克隆技术的发展方向*8.3动物克隆的影响因素一、卵母细胞对核移植效率的影响1、卵母细胞来源克隆牛研究中多用屠宰牛卵巢回收卵作核受体。卵供体动物的年龄和生产状况对重组胚的发育能力也有影响。当用经产母猪的卵母细胞为受体时,卵裂率及囊胚率显著高于青年母猪的卵母细胞(Teale等,1994)。*对于种间核移植,当以水牛体细胞为供体,以水牛和黄牛IVM（IVM：卵子体外成熟，是指未成熟卵母细胞体外培养成熟的方法）卵母细胞为受体进行核移植时，二者在融合率、卵裂率及囊胚发育率上均无差异。在克隆犬的研究中发现,牛卵母细胞作受体时似乎优于犬卵母细胞(Willadsen,1982)。*卵母细胞的卵龄对猪核移植效率的影响陈乃清，赵浩斌（1999）对核移植中，猪卵母细胞的卵龄对核移植效率的影响进行了研究，结果表明：体外成熟培养48h的猪卵母细胞最适合作为核受体，其激活率达78.3%，并无裂解；去核率高达90%；在作为核受体进行核移植时，融合率为75%；重构胚胎的卵裂率为64.6%；卵龄进一步增大，激活率略有增加，但去核率、融合率和卵裂率均下降。*2、卵母细胞及供体细胞的胞质容量去核时所吸除的胞质量与移入的供体细胞体积相似时有利于重组胚的发育,把供体细胞移入含有半量胞质的受体中时,不能发育到囊胚,但将供体细胞的胞质去除之后,则可获得10%的囊胚发育率(Rorie等,1985)。*3、卵母细胞去核方案TⅡ期去核较MⅡ期去核所获重组胚的囊胚率显著升高,且质量也更好,这可能与TⅡ期去核卵母细胞经历了激活和排出PBⅡ