DB62T 2948-2018 马铃薯种质资源离体保存技术规程.docxVIP

ICS65.020.01

B05

DB62

甘肃省地方标准

DB62/T2948—2018

马铃薯种质资源离体保存技术规程

2019-01-01实施2018-11-23发布

2019-01-01实施

甘肃省市场监督管理局发布

I

DB62/T2948—2018

目次

前言 II

1范围 1

2规范性引用文件 1

3缩略语 1

4术语和定义 1

5组织培养 2

6离体保存 4

II

DB62/T2948—2018

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由甘肃省农业科学院提出。

本标准由甘肃省粮食作物栽培标准化技术委员会归口。

本标准起草单位：甘肃省农业科学院马铃薯研究所。

本标准主要起草人：齐恩芳、吕和平、文国宏、贾小霞、刘石、王敏、李高峰、李建武、张武、黄伟。

DB62/T2948—2018

马铃薯种质资源离体保存技术规程

1范围

本标准规定了马铃薯种质离体保存技本规程的缩略语、术语和定义，组织培养、离体保存等技术规程。

本标准适用于马铃薯种质繁源的离体保存。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必可少的凯是注日期的引用文件，仅注母期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)道用于本文件。

GB18133铃幕种薯

3缩略语

下列缩略谱适用于本文件。

PVX:马铃薯X病毒(PotatovirusX,PYX)

PVY:马铃薯病毒(PotatovirusY,PVY)

PVS:马铃善病毒(PotatovirusskBM8)

PVA:马铃善病毒(PotatovirusAPVA)

PVM:马铃善病毒(PotatovirsM,PVM)

PLRV:马铃薯卷叶病毒(Potatolenirollvirus,PLRV)

PSTVd:马铃薯纺锤块茎类病毒(PotatosspindletubexiodPSTVd

DAS-ELISA:双抗体夹心酶联免疫吸附测定(DoubleAngbody/sandwichenzymelinkedimmunosorbentassay,DALISA)

R:双向聚丙烯酰胺凝胶电泳法(ReturnPolyacrlamideGielElectrophoresis)

4术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

4.1

外植体

用于马铃薯茎尖培养的幼芽段。

4.2

培养基

一种人工配制的、适合培养材料生长繁殖的混合养料。主要由一定比例的无机盐、有机物、蔗糖、植物生长调节剂组成，其中不加凝固剂呈液态的培养基质称为液体培养基，加入凝固剂呈固态的培养基质称为固体培养基。

工

2

DB62/T2948—2018

4.3

母液

把培养基中的各种大量元素用量扩大10倍，微量元素、有机元素和植物生长调节剂等用量扩大100倍，分别或混合溶解制成的浓缩液。

4.4

脱毒试管苗

在无菌条件下，应用茎尖分生组织培养技术获得的，不带PVX、PVY、PVS、PVA、PLRV、PVM病毒和PSTVd类病毒，在封闭容器内繁殖的试管苗。

4.5

试管薯

脱毒苗经诱导培养，直接在试管内结的小薯。

4.6

离体保存

将试管苗、试管薯等植物组织培养物储存在使其抑制生长或无生长条件下，达到保存目的的方法。

5组织培养

5.1培养基制备

5.1.1母液的配制和保存

称量：按照配方称取药品。每称好一种药品应作一记号。

溶解：用蒸馏水或双蒸水等纯度较高的水溶解药品。有些药品不易溶于水，可以加热并不断搅拌促使溶解，再加水定容。

配制：母液可配成10倍～100倍。各种药品必须在充分溶解后才能混合，同时在混合时要注意先后次序，把Ca+、Mn+、Ba+和SO?2-、PO?3-错开，以免生成硫酸钙、硫酸钡、磷酸钙、磷酸锰等沉淀。在混合各种无机盐时，其稀释度要大，慢慢地混合，同时边混合边搅拌，最后定容。

保存：配制好的母液瓶应分别贴上标签，注明母液名称，配制倍数、日期及配制人姓名。母液最好在2℃~4℃的冰箱中贮存，有机类物质贮存时间不宜过长，无机盐母液在一个月内用完。发现有霉菌深沉产生，则不能再使用。

5.1.2培养基制备程序

水、母液、糖、琼脂→混合→pH调试→加热溶解

试管→水洗→干燥→分装→加封口材料→高压灭菌→冷却→