DB43_T 1966-2020 大型溞繁殖毒性试验技术规程.docxVIP

ICS65.020CCSB16

DB43

湖南省地方标准

DB43/T1966—2020

大型溞繁殖毒性试验技术规程

GuidelineforReproductionTestofDaphniamagnaStraus

2020-12-29发布2021-03-29实施

湖南省市场监督管理局发布

DB43/T1966—2020

I

目次

前言 Ⅲ

1范围 1

2规范性引用文件 1

3术语和定义 1

4环境条件 1

5仪器设备和器材 2

6培养基 2

7试验溶液 2

8受试生物 2

9试验方法 3

10质量保证 4

附录A（资料性）ElendtM4培养液和M7培养基的制备 5

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III

前言

本文件按照GB/T1.1—2020给出的规则起草。

本文件某些内容可能涉及专利。本文件发布机构不承担识别这些专利的责任。

本文件由湖南省农业农村厅提出。

本文件由湖南省农业标准化技术委员会归口。

本文件起草单位：湖南省植物保护研究所,长沙艾格里生物科技有限公司。

本文件主要起草人：陈昂、刘勇、张德咏、张战泓、罗杰、蒋桂芳、陈武瑛、熊浩、罗香文。

DB43/T1966—2020

1

大型溞繁殖毒性试验技术规程

1范围

本文件规定了大型溞繁殖试验的环境条件、仪器和设备、培养基、试验方法、质量保证与质量控制、数据处理等。

本文件适用于湖南省实验室内大型溞繁殖毒性试验。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB14942食品容器、包装材料用聚碳酸酯成型卫生标准

GB/T31270化学农药环境安全评价试验准则

NY/T1667农药登记管理术语

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

亲溞ParentAnimals

试验开始时用于繁殖的雌溞。

3.2

幼溞Offspring

试验期间亲溞所产的溞。

3.3

死亡Mortality

溞体不能游动，或轻晃试验容器，15s内溞的附肢或后腹部也未见活动。

4环境条件

4.1光照

每天光照16h，光照强度不超过1500lx。

4.2温度

试验的温度在18～22℃范围内。对于同一个试验，温度变化不得超过2℃。

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2

4.3溶解氧

试验开始与试验期间，溶解氧浓度应大于3mg/L。

4.4pH

pH在6～9的范围内。正常情况下，任何一个试验中pH值的变化不应大于1.5个单位。

4.5硬度

硬度（以CaCO3计）应大于140mg/L。

5仪器设备和器材

试验容器和其它试验溶液接触的器皿应为全玻璃制品，或由其它化学惰性材料制成。试验容器通常为玻璃烧杯。需要的主要仪器为：

a）溶解氧测定仪；

b）适当的温度控制设备；

c）pH计；

d）水质硬度测定仪；

e）测定水中总有机碳（TOC）或化学需氧量（COD）的设备；

f）光照控制设备以及光度计等。

g）色谱分析仪、质朴分析仪等

6培养基

6.1推荐ElendtM4和M7培养基（见附录A）。

6.2ElendtM4和M7培养基不能用于含有金属受试物的测试，对于含有金属的供试品，可选择替代培养基，如不含有EDTA的ASTM重组水。

7试验溶液

7.1不同浓度的试验溶液一般由储备液稀释而成。储备液最好是将供试品加入到试验用水中配制而成。

7.2若使用溶剂或分散剂助溶，其在培养基中的最终浓度应≤0.1mg/L。

8受试生物

8.1受试生物为大型溞（DaphniamagnaStraus），保持良好的培养条件，使大型溞的繁殖处于孤雌生殖状态，且试验结束时每只存活亲溞所产存活幼溞的平均值≥60只。

8.2试验开始时，试验用溞应是出生小于24h的非头胎溞。试验用溞应来源于同一个健康的保种培养，即未表现任何受胁迫现象（如死亡率高，出现雄溞和冬卵，头胎延迟，体色异常等）。日常培养条件（光照、温度、培养液、喂食单位体积的动物数量）应当和试验条件一致，如果试验时溞类培养基与日常使用的培养基不同，试验前最好设置驯养期，一般试验用溞应在试验条件下驯