DB13T 1721-2013 辣椒轻斑驳病毒检验检测技术规程.pdfVIP

ICS65.020

B16

DB13

河北省地方标准

DB13/T1721—2013

辣椒轻斑驳病毒检验检测技术规程

TechnicalRegulationsforDetectionofPeppermildmottlevirus

2013-05-27发布2013-06-15实施

河北省质量技术监督局发布

DB13/T1721—2013

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由河北农业大学提出。

本标准起草单位：河北农业大学。

本标准主要起草人：王亚南、曹克强、王树桐、胡同乐、杨军玉、冀志蕊。

I

DB13/T1721—2013

辣椒轻斑驳病毒检验检测技术规程

1范围

本标准规定了辣椒轻斑驳病毒（Peppermildmottlevirus，PMMoV）的检验检测与鉴定方法。

本标准适用于可能带有辣椒轻斑驳病毒的甜（辣）椒种子和苗木的检验检测工作。

2术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

2.1

辣椒轻斑驳病毒病

是由辣椒轻斑驳病毒危害辣椒属植物引起的一种病毒病害，在甜（辣）椒上表现为不同程度的叶片

或（和）果实的变色、斑驳、畸形或坏死条斑甚至植株矮化等症状。

2.2

辣椒轻斑驳病毒

是危害辣椒属植物的一种烟草花叶病毒属（Tobamovirus）病原病毒，学名为Peppermildmottlevirus，

简写PMMoV。病毒粒体直杆状，基因组为正单链RNA，由6357个核苷酸组成。

3原理

依据PMMoV具有很强的免疫原性，可采用ELISA或免疫胶体金试纸条方法进行检测；依据PMMoV基因

组序列的特异性，可采用RT-PCR方法进行检测。PMMoV病原特性见附录A。

4材料、仪器、用具及药品

4.1材料

甜（辣）椒种子、叶片或果实。

4.2仪器、用具

超低温冰箱（箱内温度可达-80℃以下）；

高速冷冻台式离心机（最高转速在12000r/min以上）；

PCR仪（常规配置）；

凝胶成像系统（常规配置）；

电泳仪（常规配置）；

水平电泳槽（常规配置）；

酶标仪（常规配置）；

1

DB13/T1721—2013

各种量程的可调移液器（1000L、200L、20L、10L、5L）；

各种吸头（1000L、200L、20L、10L、5L）；

离心管（1.5mL、0.6mL、0.2mL）；

量筒（1000mL）。

4.3主要试剂

主要试剂和缓冲液见附录C、D、E。

5调查与取样

5.1田间调查

在甜（辣）椒生长期进行调查，带有附录B记述的PMMoV为害症状的植株为疑似病株。

5.2种子取样

在11月～翌年2月份对市场销售的甜（辣）椒种子进行扦样（数量以满足检测鉴定所需为限），然

后进行检测与鉴定。

5.3田间样品采集与保存

选取疑似病株上症状明显的叶片或果实（其数量以满足检测鉴定所需为限），装入聚乙烯塑料袋中

密封，放入带有冰块的采集箱中带回实验室。采集袋标签应注明采集时间、地点、