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ICS65.150
DB2102
B51
大连市地方标准
DB2102/T0005—2020
海带配子体采苗及育苗技术规程
TechnicalSpecificationforGametophyteclonalbreedingofSaccharinajaponica
大连市市场监督管理局
发布
DB2102/T0005—2020
前
言
本标准按照GB/T1.1—2020给出规则起草。
本标准由大连市农业农村局提出并归口。
本标准主要起草单位:大连海宝渔业有限公司。
本标准主要起草人:冷晓飞、张喜昌、刘剑波、孙颖、许淑芬。
本标准发布实施后,任何单位和个人如有问题和意见建议,均可以通过来电和来函等方式进行反馈,
我们将及时答复并认真处理,根据实际情况依法进行评估及复审。
归口管理部门:大连市农业农村局
通讯地址:大连市西岗区新开路87号
联系电话:0411标准起草单位:大连海宝渔业有限公司
通讯地址:辽宁省大连市旅顺口区铁山街道柏岚子村1号
联系人:刘剑波
联系电话I
DB2102/T0005—2020
海带配子体采苗及育苗技术规程
1
范围
本标准规定了海带配子体采苗及育苗的环境与水质、设施、配子体扩增培养、配子体育苗和苗帘出
库、运输。
本标准适用于大连地区室内海带配子体采苗及育苗。
2
规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,标注日期的引用文
件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用
于本文件。
NY5052无公害食品海水养殖用水水质
NY5362无公害食品海水养殖产地环境条件
SC/T2024种海带
育苗场址应选择远离城市污水和工业污水排放口,附近没有大型河流入海,岩石或砂质底质的沿海
区域,其它环境条件应符合NY5362的规定,水质应符合NY5052的规定。
用于配子体的扩增培养,应为配有制冷设施的保温室,内设培养台架和充气设备,台架层高50cm,
各层顶部应配备LED灯管。
1
DB2102/T0005—2020
育苗室设置应为温室结构,以东西走向为宜。屋顶下设置可拉伸的黑色和白色布帘各一层,窗口设
深色布帘。育苗池呈平面并联式,单池规格10m×1.4m×0.5m。池内设搅拌机保持循环水流。
5.3供排水系统
包括泵房、沉淀池、砂滤罐(塔)、储水池、回水池等。
5.4制冷系统
包括集成式制冷机、制冷槽、砂滤罐、回水槽等。
6配子体扩增培养
6.1配子体准备
6.1.1游孢子采集与配子体培育
在海带成熟季节,参照SC/T2024的规定选择种海带。用消毒剪刀剪下3cm×3cm含有孢子囊的藻体,
以灭菌纱布蘸消毒海水清洗藻体表面浮泥杂藻,阴干1h~3h后,转移到盛有消毒海水的烧杯中放散游
孢子。5min后镜检,视野(×100)中游孢子数量达到10个~20个以上时,取中上层孢子液,接种到多
个加有培养液的消毒培养皿中培养20d,获得配子体。培养条件为温度15℃~20℃,光照500lx~1000
lx,光周期L:D=12h:12h。培养液为灭菌海水中添加NaNO3-N10mg/L,KH2PO4-P2mg/L,F/2培养基1
ml/L。
用微细管分离法分离雌雄配子体,分别移到数个直径18cm盛有培养液的培养皿内培养。培养条件
为:温度15℃~20℃,光照500lx~1000lx。当配子体生长至布满培养皿底面时,将雌雄配子体用消
毒毛刷刷下,转移到50ml透明试管中,在温度4℃~8℃,光照低于50lx条件下储藏保种。每月更换一
次培养液。培养液为在灭菌海水中添加NaNO3-N10mg/L,KH2PO4-P2mg/L。
配子体扩增应在采苗前6个月进行,在适宜的培养条件下,扩增后的配子体生物量每月可翻一倍。
采苗时,一个苗帘需求雌雄配子体各0.5g,因此,可根据苗帘数确定配子体需求量和扩增时间。
将低温储藏的雌、雄配子体分别移入组织捣碎机中,加灭菌冰海水至1000ml,16000r/min切碎
——扩增培养用海水应为煮沸消毒的砂滤海水;
——培养液温度应控制在15℃~20℃;
2
DB2102/T0005—2020
6.5扩增培养管理
6.5.1更换培养液
培养液2周更换一次,更换前应停止充气,使配子体自然沉降于烧瓶底部,将烧瓶中上层的旧培养
液倒出。配子体量较多时,用300目筛绢收集倒出的配子体。
6.5.2分瓶扩增培养
配子体生长至15g/L~20g/L时应分瓶培养。若配子体呈絮状,直接分瓶培养。若配子体呈簇团状,
用30
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