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浅议在“过氧化氢酶活性实验”中培养学生的创新探究能力

李万瑞陈加敏

摘要利用“微小压强计”设计了氧气含量测定装置，通过该装置，定性和定量地测定了多种植物材料的过氧化氢酶活性。以红薯为材料，创新性地测定了pH和温度对过氧化酶活性的影响。实验的开展提升了学生的科学探究能力，发展了学生的高级思维能力和创新能力。

关键词过氧化氢酶酶活性pH温度

中图分类号G633.91

文献标志码B

《普通高中生物学课程标准（2017年版2020年修订）》（以下简称《课程标准》）中提出：为了帮助学生达成“细胞的功能绝大多数基于化学反应，这些反应发生在细胞的特定区域”概念的理解，应开展“探究酶催化的专一性、高效性及影响酶活性的因素”实验。在《课程标准》探究实验的教学实施建议中提到：在探究活动中，鼓励学生自己观察、思考、提问，并在提出假设的基础上进行探究活动方案的设计和实施;鼓励实验材料的创新，在重视定性试验的同时，也应重视定量实验，让学生在量的变化中了解事物的本质。

人教版等教材选用猪肝研磨液作为“探究过氧化氢酶高效性和影响因素”的实验材料。但基于《课程标准》的要求和建议，教材提供的探究实验有以下值得思考的问题：①猪肝研磨液具有气味，实际教学中常引起部分学生不适，也不易保存。能否寻找到更简单易行的材料？②能否在定性的基础上，定量地检测酶的活性？③由于过氧化氢分解易受到温度影响，教师普遍认为不能探究温度对过氧化氢酶的影响。但过氧化氢酶的本质是蛋白质，活性必然受到温度的影响。能否设计出实验，探究温度对该酶的影响？针对这三个问题，在教师的引导下，学生利用物理实验中常用的“微小压强计”，设计出“微小压强计”氧气含量测定装置。学生利用该装置，在直观定性观察的基础上，定量检测了多种生物材料中的过氧化氢酶活性，自主测定了pH对红薯过氧化氢酶活性的影响;创新实验方案，探究了温度对过氧化氢酶活性的影响。该实验展科学地测定了过氧化氢酶的活性，有利于加深学生对酶特点的理解，提升学生的科学探究能力、质疑精神、高级思维和创新能力。

1微小压强计氧气测定装置的设计

实验用具：利用锥形瓶、棉线，铁钩、试管、橡胶管、橡皮塞、微小压强计、滴管、铁架台、注射器等。

装置安装：在250mL的锥形瓶中放入适量的过氧化氢溶液，橡皮塞上插上铁丝和导气管，用棉线将实验材料悬挂在铁丝的下端。在橡皮塞安装在锥形瓶口上，通过导气管和橡胶管连通铁架台上的微小压强计，并在装置的所有连接处涂上凡士林进行密封。实验装置如图1所示。

实验操作程序：先用棉线吊着铁丝，铁丝上挂有固体实验材料，目的是防止实验材料中的过氧化氢酶在测定前与过氧化氢溶液接触。然后，用手按压铁丝，使实验材料与锥形瓶中的过氧化氢溶液接触反应，或者通过注射器将液体实验材料直接定量注射入反应溶液中。一定时间内微小压强计的刻度变化可以反映氧气的产生量。

2多种材料中过氧化氢酶活性的测定

学生利用“微小压强计”氧气含量测定装置测定了苹果、梨、香蕉、红薯、胡萝卜、马铃薯中的过氧化氢酶活性。实验方法如下：首先利用水果模具，获取厚度为2mm的相同数量和形状的实验材料，用天平称量材料的重量，利用“微小压强计”氧气含量测定装置，测定各种植物材料与体积浓度为3%的过氧化氢溶液反应产生的氧气含量，每种材料重复3次实验，计算出每克材料10min内引起的“微小压强计”刻度的变化的平均值。实验结果显示红薯中过氧化氢酶活性较高，适合用于替换肝脏研磨液以探究过氧化氢酶活性的影响因素。实验结果如图2所示。

3pH对过氧化氢酶活性的影响

以红薯为材料，教师提供了多种可选择的实验用具，引导学生自主探究pH对红薯的过氧化氢酶活性的影响。实验方案如下：首先配制pH为3-8的磷酸氢二钠一柠檬酸缓冲溶液，与适量过氧化氢溶液混合，配制成pH分别为3、4、5、6、7、8且体积浓度為3%的过氧化氢溶液。与水果磨具制取的红薯块反应，利用微小压强计氧气含量测定装置，测定10min内氧气的产生量，实验结果如图3所示。

实验结果表明，红薯过氧化氢酶的最适pH在6-8之间。在此实验的基础上，学生在pH6-8之间设置以0.2为梯度的pH条件，探究其对红薯过氧化氢酶活性的影响。实验结果表明，红薯过氧化氢酶的最适pH为7.4左右（图4）。

4温度对过氧化氢酶活性的影响

由于高温会促进过氧化氢的分解，在特定温度下，难以说明过氧化氢的分解是酶的催化作用，还是温度的影响。因此在教学中，大多教师认为不能用过氧化氢酶探究温度对酶活性的影响。但是，过氧化氢酶的化学本质是蛋白质，其活性必然受到温度的影响，因此如何巧妙而科学地设计实验，评价温度对过氧化氢酶活性的影响，极大地引发了学生的探究兴趣。在教师的引导下，学生设计出创新的探究方案，并开展了实验。探究过程如下：

提出问题：如何科学地探究温度对