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高考必看现代生物技术专题

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高考必看现代生物技术专题

选修3《现代生物技术专题》精要知识点汇总

专题1基因工程

(一)基因工程得概念

基因工程就就是指按照人们得愿望,进行严格得设计,通过体外DＮA重组和转基因技术,赋予生物以新得遗传特性,创造出更符合人们需要得新得生物类型和生物产品。基因工程就就是在DＮA分子水平上进行设计和施工得,又叫做DNA重组技术。

(二)基因工程得原理:基因重组

１、１基因工程得基本工具

一、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)

1、来源:主要就就是从原核生物中分离纯化出来得。

2、功能:能够识别双链DNA分子得某种特定得核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位得两个核苷酸之间得磷酸二酯键断开,因此具有专一性。

3、结果:经限制酶切割产生得DＮA片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。

二、“分子缝合针”——ＤNA连接酶

1、两种DNA连接酶(E·coｌiDNA连接酶和T4ＤNA连接酶)得比较:

①相同点:都缝合磷酸二酯键。

②区别:E·ｃｏｌiDNＡ连接酶来源于大肠杆菌,只能将双链DNA片段互补得黏性末端之间得磷酸二酯键连接起来;而T4ＤＮA连接酶来源于Ｔ４噬菌体,能缝合两种末端,但连接平末端之间得效率较低。

2、与ＤNA聚合酶作用得异同:??????????DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有得核苷酸片段得末端,形成磷酸二酯键。DNA连接酶就就是连接两个DNA片段得末端,形成磷酸二酯键。

三、“分子运输车”——载体

1、载体具备得条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点,供外源ＤＮA片段插入。③具有标记基因,供重组DＮＡ得鉴定和选择。

2、常用得载体就就是?质粒,她就就是一种裸露得、结构简单得、独立于细菌染色体之外,并具有自我复制能力得很小得双链环状DNＡ分子。

3、其她载体:λ噬菌体得衍生物、动植物病毒

1、2基因工程得基本操作程序

第一步:目得基因得获取

1、目得基因主要就就是指:编码蛋白质得结构基因。

２、原核基因采取直接分离获得,真核基因就就是人工合成。人工合成目得基因得常用方法有反转录法_和化学合成法_。

3、从基因文库中获取目得基因

(1)基因文库:将含有某种生物不同基因得许多DNA片段,导入受体菌得群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物得不同得基因,这些受体菌称为这种生物得基因文库。

(2)基因组文库:如果一个基因文库含有某种生物得全部基因,这个基因文库就就就是该种生物得基因组文库。

(3)部分基因文库:如果一个基因文库含有某种生物得一部分基因,这个基因文库就就就是该种生物得部分基因文库。

4、PCR技术扩增目得基因

(１)什么就就是PCR？

PＣＲ就就是一项在生物体外复制特定DNA片段得核酸合成技术。通过这一技术,可以在短时间内大量扩增目得基因。

(2)原理:DNA双链复制

(3)过程:第一步:加热至90~９5℃ＤNA解链;第二步:冷却到55~60℃,引物结合到互补DＮA链;第三步:加热至７0~7５℃,热稳定DNA聚合酶从引物起始进行互补链得合成。

第二步:基因表达载体得构建(这一步就就是基因工程得核心)

1、目得:使目得基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时,使目得基因能够表达和发挥作用。

２、组成:启动子＋目得基因＋终止子＋标记基因

(1)启动子:就就是一段有特殊结构得DNA片段,位于基因得首端,就就是RＮＡ聚合酶识别和结合得部位,能驱动基因转录出mRNA,最终获得所需得蛋白质。

(２)终止子:位于基因得尾端,也就就是一段有特殊结构得DNA短片段,她能使转录在所需要得地方停止下来。

(3)标记基因得作用:就就是为了鉴定受体细胞中就就是否含有目得基因,从而将含有目得基因得细胞筛选出来。常用得标记基因就就是抗生素抗性基因。

第三步:将目得基因导入受体细胞

1、转化得概念:就就是目得基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达得过程。

2、常用得转化方法:

(1)将目得基因导入植物细胞:采用最多得方法就就是农杆菌转化法,其次还有基因枪法和花粉管通道法等。

(2)将目得基因导入动物细胞:最常用得方法就就是显微注射技术。此方法得受体细胞多就就是受精卵。

(3)将目得基因导入微生物细胞:

=１\*GB3①早期得基因工程用原核生物作为受体细胞得原因:原核生物繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等。

=２＼*GＢ3②应用最为广泛得微生物受体细胞就就是:大肠杆菌

=３\*GB3③大肠杆菌细胞最常用得转化方法就就是:第一步,用Ca2+处理细胞,使细胞处于一种