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分光光度法测铁

01掌握用磺基水杨酸显色法测铁的原理和方法。02掌握分光光度计的使用方法。一、实验目的

在pH=9~11.5的NH3.H2O-NH4Cl溶液中,Fe3+与磺基水杨酸反应生成组成比1:3的黄色稳定配合物。该配合物在碱性溶液中的最大吸收波长为420nm,可在此波长下测量吸光度,由朗伯-比耳定律计算铁含量。12二、实验原理

三、分光光度计的使用方法分光光度计仪器结构功能显示器样品室波长刻度窗波长调节旋钮操作键

通电---仪器自检----预热20min;分光光度计使用方法

用MODE键设置测试模式为透射比(T)透射比(T)MODE键

波长选择:用波长调节旋钮设置所需的波长

调零打开样品室盖,在“Transmittance”方式下按“0%”键,此时仪器自动校正后显示“000.0”。“0%”键T模式

调满在比色皿槽中,依次放入参比液,样品液1和样品液2等,盖上样品室盖(注意透光截面垂直于光路方向)。参比液样品液1样品液2样品液3

将参比液拉入光路中,按“100%T”键调T为100%,此时仪器显示“BLA”,表示仪器正在自动校正,校正完毕后显示“100.0”。“100%T”键

样品测定:将MODE转换为“ABSORBANCE”,显色屏读数为0.000,然后将样品液分别拉入光路中,此时显示测得的样品吸光度。

分光光度计的使用注意事项:比色皿的清洁程度,直接影响实验结果。因此,特别要将比色皿清洗干净。装样前处理:自来水反复冲洗→蒸馏水漂洗2次→待装溶液漂洗2次。必要时,需用浓硝酸或铬酸洗液短时间浸泡。用完后用自来水和蒸馏水洗净并用檫镜纸檫干放回比色皿盒中。

(2)拿放比色皿时,应持其“毛面”,不要接触“光面”。光面毛面(3)若比色皿外表面有液体,应用擦镜纸朝同一方向拭干,以保证吸光度测量不受影响。

(4)比色皿内盛液应为其容量的2/3,过少会影响实验结果,过多易在测量过程中外溢,污染仪器。容量的2/3(5)比色皿的光面要与光源在一条线上。光透过窗口

四、实验步骤序号1(参比)23456待测液铁标准液体积/mL0.001.002.003.004.005.005.0010%NH4Cl/mL4.002%磺基水杨酸/mL2.00氨水(1+10)/mL滴加至溶液变黄色后再多加4.00mL定容至/mL50.0050.0050.0050.0050.0050.0050.00吸光度Aρ(mg?L-1)取系列50mL容量瓶并编号,按下表配制系列溶液。以试剂空白作参比溶液,在420nm波长下测定各溶液的吸光度。

ρxAρAx以吸光度为纵坐标,铁含量为横坐标,绘制工作曲线。由工作曲线确定待测溶液的含量。

在用磺基水杨酸测定Fe3+时,在pH=9~11.5范围形成稳定的3:1黄色配合物,且不容易受干扰。本实验以NH3-NH4Cl缓冲溶液控制。待测溶液的浓度一定要在工作曲线线性范围内,如果浓度超出直线的线性范围,则有可能偏离朗伯-比耳定律,导致测量误差较大。用移液管移取试剂,注意顺序,不要混用移液管。321五、注意事项

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