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微检室清洗工艺及操作规程
2.1无菌操作前的准备工作:
2.1.1每次无菌操作结束后,将用过的吸管、培养皿等物品拿出微检室,并用75%酒精擦拭操作台桌面及周围。
2.1.2每周用75%酒精或0.25%新洁尔灭擦拭微检室(缓冲间)四周墙壁。地面及室内其它物品。
2.1.3随时清理室内物品及培养皿、吸管、三角瓶等,超过一周未使用的,须重新进行严格灭菌。???
2.1.4定期清洗工作服、工作鞋、工作帽、口罩等。
2.1.5每天做空气捕捉培养检验,掌握室内无菌情况,确定空间是否需要彻底消毒杀菌。
2.1.6根据空间微生物检测结果,若每个平皿内菌落不超过4个,则可以认为无菌程度良好;若菌落数很多,则应对无菌室用甲醛熏蒸彻底消毒(配制35~40%的甲醛液,其使用量为每立方米空间2ml)。
2.1.7培养基的配制:
在培养基配置前,首先要了解培养基的用途、成分,各成分在培养基中的作用原理,是否能承受加热灭菌,需要调整的PH值等,然后再着手配置。培养基的制备按下述顺序进行:
配料→溶解→调整PH值→过滤→加琼脂熔化→定容→分装→包扎→灭菌。
2.1.8玻璃器皿灭菌程序:
为保证实验的准确性,微生物检验所需的试管、三角瓶、移液管和培养皿等,除与其他实验室要求一样需洗刷干净外,还需要灭菌即通过杀灭所有微生物的营养细胞和芽孢,使其永远失去生命力。玻璃器皿的洗涤、灭菌程序如下:
(1)新玻璃仪器使用前必须用2%盐酸浸泡。
(2)用洗衣粉水或洗涤灵浸泡(热水煮沸)→清水冲洗→烘干→包扎→灭菌
(3)通常使用150℃、3小时,160℃、2小时,或170℃、1小时干热灭菌法。???
注意:
(1)干热灭菌的温度不能超过180℃,对带有棉花塞、纸包的器皿,温度宜采用150℃、3小时的灭菌法,温度不宜过高,不要紧贴烘箱器壁,以免棉花塞、纸发脆、焦化,甚至着火。
(2)灭菌操作时,必须等恒温后再离人,灭菌完毕后或温度升温过程中,须在60度以下才能打开箱门。
(3)如果不慎烘箱冒烟,应立即切断电源,切忌打开箱门,以免高温下棉花等遇见空气后即燃烧,酿成火灾。
2.1.9每班对微检室(包括缓冲间)利用打开紫外灯灭菌30分钟。
2.2无菌操作要点:
2.2.1用75%酒精或0.25%新洁尔灭溶液擦手;
2.2.2操作过程不离开酒精灯无菌区;
2.2.3换下的棉塞不得乱放;
2.2.4接种工具,使用前必须经火焰灼烧灭菌;
2.2.5操作要准确、迅速;
2.2.6接种工具使用后,必须经火焰灼烧灭菌后,才能放到桌上;
2.2.7所有使用过的器皿均须严格灭菌。
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